激活内质网应激逆转非小细胞肺癌化疗耐药及其靶点药物B19机理研究

本课题发现一种新的姜黄素单羰基衍生物可通过ER stress机制诱导肿瘤细胞凋亡。B19呈量效依赖诱导非小细胞肺癌H460细胞凋亡，Western Bolt和RT-PCR显示B19显著增加ER stress相关蛋白ATF-4、XBP-1、CHOP、Caspase-3和p53的表达以及c-Jun和ERK的磷酸化，表明ER stress参与B19诱导肿瘤细胞凋亡。siRNA技术减少CHOP表达可减弱B19抑制 H460细胞增殖的作用，提示CHOP蛋白可能是B19诱导H460细胞凋亡关键蛋白。B19可通过抑制内质网钙离子释放，导致内质网内钙离子平衡失调，进而诱发非折叠蛋白反应(UPR)，最终导致ER stress。B19对非小细胞肺癌耐受细胞A549/cDDP具有剂量依赖性抑制作用，H460细胞接种至BALB/ca裸鼠实验证实，腹腔注射B19溶液10mg/kg和50mg/kg显著抑制H460移植瘤的增生，表明B19在体内也有显著的抑癌的作用。同时我们也证实仅1μM B19与顺铂合用时B19可以显著增强顺铂对耐药肺癌细胞株A549/cDDP细胞的抑制作用，B19可以促进顺铂诱导肿瘤细胞凋亡，使对顺铂不敏感的A549/cDDP细胞变的重新敏感。此外我们还证实另一个姜黄素单羰基衍生物B63剂量依赖性抑制H460和H358增殖，破坏细胞内质网钙稳态，诱导H460细胞产生ER stress，显著增加ER stress信号通路转导蛋白ATF-4、XBP-1、CHOP、GRP78表达，并激活caspase-3诱导细胞凋亡。总之本课题基本完成了申请书内的内容，同时为了更好的新药开发，我们还开展了B19/B63对肺癌、卵巢癌、鼻咽癌等的抗癌作用。课题负责人共发表6篇第一作者或通讯作者的SCI收录论文，包括J Med Chem和Int J Cancer等主流国际期刊，申请并获得授权发明专利一项，课题的部分研究工作获2011年浙江省科技进步三等奖、日本第70届癌症会议Travel award。通过本课题我们初步建立了以内质网应激为靶点的抗肿瘤药物研究平台，为下一步的工作奠定了较好的基础。