过继免疫治疗（AIT）作为肿瘤治疗方法之一经历了30年的风雨历程，多年来研究者一直致力于提高过继转移T细胞的靶向性、杀伤性和持久性，期望通过高效的抗原特异性T细胞、穿越肿瘤的多重保护屏障实现对肿瘤细胞的致命追杀。近年来，以嵌合抗原受体（CAR）修饰T细胞为代表的AIT新策略为肿瘤过继治疗带来了新的希望，CAR将单克隆抗体的特异性结合和T细胞的杀伤活性相结合，赋予T细胞肿瘤靶向性、更强的杀伤活性和持久的生命力。本课题以脑胶质瘤表达率很高的肿瘤特异性抗原，表皮生长因子受体III型突变体（EGFRvIII），为分子靶点，构建EGFRvIII CAR，制备病毒修饰T 细胞（CAR-T），体外试验检测CAR-T细胞的靶向杀伤活性，动物实验测试CAR-T细胞的肿瘤抑制作用。结果：成功构建了第二代和第三代CAR (EGFRvIIIscFv-ICOS-CD3ζ，EGFRvIIIscFv-CD28-CD137-CD3ζ)，包装慢病毒（LV-EGFRvIII/CAR），滴度1-2x106TU/ml，修饰T细胞表达率达70%，51Cr释放法证实EGFRvIII/CAR-T细胞对EGFRvIII阳性的U87细胞有特异性杀伤作用，ELISA法检测EGFRvIII/CAR-T细胞IFN-γ的释放，可高达（2103.6±97.58）pg/ml，证实了转染后淋巴细胞IFN-γ的释放是EGFRvIII肿瘤抗原特异性的。裸鼠肿瘤模型（EGFRvIII+ U87胶质瘤细胞移植）动物实验显示静脉和肿瘤内部注射EGFRvIII/CAR-T细胞可显著抑制肿瘤的生长。本研究初步建立了靶向EGFRvIII的CAR修饰T细胞肿瘤过继免疫治疗新方法，完成了体外和动物实验，CAR-T细胞的临床应用还需要注册临床试验完成进一步的安全性和有效性研究。