FSH抑制猪颗粒细胞中促凋亡蛋白Bim表达的分子机制
批准号:
31072031
项目类别:
面上项目
资助金额:
33.0 万元
负责人:
曾申明
依托单位:
学科分类:
畜禽繁殖学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
韩国才、唐大伟、鲍忠剑、王宪龙、仵毅、武玥、刘振兴、李迎
中文摘要
为探讨促凋亡蛋白Bim在卵泡闭锁中的作用,以及FSH调控猪颗粒细胞中Bim表达的分子机制,课题组将在前期工作的基础上,首先,采用TUNEL和免疫组化等技术确认Bim蛋白的表达水平与卵泡发育状况的相关性;然后,用已建立的猪颗粒细胞体外培养模型,探讨FSH浓度与颗粒细胞凋亡、Bim基因表达水平的关系;接着,分别用添加PI3K、MAPK和ERK激酶通路抑制剂的培养液,通过凋亡检测筛选FSH对Bim调控的主要路径;再结合基因超表达、RNA干涉以及Western Blot等技术,探索FSH对Bim调控的关键因子;最后,采用免疫组化技术观察关键调控因子表达水平与猪卵泡闭锁状态的关系,验证此通路在活体中是否存在。研究结果将从细胞凋亡角度揭示FSH与卵泡发育或闭锁的分子联系,丰富哺乳动物的卵泡闭锁理论。同时,通路中发现的关键因子可能为控制哺乳动物卵泡发育药物的研发提供新的靶点。
英文摘要
本课题首先分析了bim基因在猪颗粒细胞中的表达水平与卵泡闭锁的关系。然后,依据颗粒细胞和卵丘细胞对不同激素或因子敏感性差异,采用原代颗粒细胞血清饥饿培养和去除卵母细胞的卵丘细胞复合体培养为模型,分别研究了FSH和生长分化因子9(GDF9)对颗粒细胞和卵丘细胞中bim基因表达及凋亡的影响。最后,深入研究了FSH和GDF9调控bim基因表达的分子通路。研究结果表明,卵泡体细胞中bim基因的表达水平与猪卵泡闭锁状态密切相关,bim表达水平升高,卵泡闭锁,反之,卵泡发育正常;超表达BimEL蛋白能导致体外培养的猪颗粒细胞凋亡。FSH和GDF9分别通过抑制颗粒细胞和卵丘细胞中BimEL蛋白表达来阻止细胞凋亡,并且这种抑制作用是通过PI3K/Akt/FOXO3a信号通路来实现的。本项目发现了FSH和GDF9新的生物学功能和其分子机制,并提出bim基因在猪卵泡闭锁过程中发挥关键作用。在项目完成期间,已发表SCI研究论文5篇,获得国家发明专利1项,培养10名研究生,受邀国际学术会议学术报告1次。
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DOI:
10.1074/jbc.m111.293274
发表时间:
2012-01
期刊:
The Journal of Biological Chemistry
影响因子:
--
作者:
[Xian-long Wang;Yi Wu;L. Tan;Zhen Tian;Jing-hao Liu;De-Sheng Zhu;S. Zeng]
通讯作者:
Xian-long Wang;Yi Wu;L. Tan;Zhen Tian;Jing-hao Liu;De-Sheng Zhu;S. Zeng
Relationship Between Differential Expression of Bax and Bcl-2 Genes and Developmental Differences of Porcine Parthenotes Cultured in PZM-3 and NCSU-23
Bax和Bcl-2基因差异表达与PZM-3和NCSU-23培养猪单性生殖发育差异的关系
DOI:
10.1016/s1671-2927(11)60177-6
发表时间:
2011-11
期刊:
Agricultural Sciences in China
影响因子:
--
作者:
[Cui Mao-sheng, Liu Zhen-xing, Wang Xian-long, Zhang Jing, Wu Yi, Han Guo-cai, Zeng Shen-ming]
通讯作者:
Zeng Shen-ming
DOI:
10.1095/biolreprod.113.108365
发表时间:
2013-09-01
期刊:
BIOLOGY OF REPRODUCTION
影响因子:
3.6
作者:
[Wang, Xian-Long, Wang, Kun, Zeng, Shen-Ming]
通讯作者:
Zeng, Shen-Ming
The disturbances of endoplasmic reticulum calcium homeostasis caused by increased intracellular reactive oxygen species contributes to fragmentation in aged porcine oocytes.
细胞内活性氧增加引起的内质网钙稳态紊乱导致衰老猪卵母细胞破碎。
DOI:
--
发表时间:
2013
期刊:
Biology of Reproduction
影响因子:
3.6
作者:
[Tang, Da-Wei, Fang, Yuan, Liu, Zhen-Xing, Wu, Yi, Wang, Xian-Long, Zhao, Shuan, Han, Guo-Cai, Zeng, Shen-Ming]
通讯作者:
Zeng, Shen-Ming
DOI:
10.1111/j.1348-0421.2012.00419.x
发表时间:
2012-03
期刊:
Microbiology and Immunology
影响因子:
2.6
作者:
[Ling Yang;Leying Zhang;Chengming Wang;Bin Wang;Xue-min Wang;S. Zeng]
通讯作者:
Ling Yang;Leying Zhang;Chengming Wang;Bin Wang;Xue-min Wang;S. Zeng
猪卵泡在闭锁过程中颗粒细胞内BimEL磷酸化修饰位点的变化规律及主要调控路径
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批准号:31672419
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项目类别:面上项目
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资助金额:64.0万元
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批准年份:2016
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负责人:曾申明
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依托单位:
FSH通过BimEL调控猪卵泡自噬的分子机制
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批准号:31470077
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项目类别:面上项目
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资助金额:88.0万元
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批准年份:2014
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负责人:曾申明
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依托单位:
IFN-τ调控牛囊胚发育的分子通路
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批准号:31172209
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项目类别:面上项目
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资助金额:60.0万元
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批准年份:2011
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负责人:曾申明
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依托单位:
钙振荡对猪体外成熟卵子凋亡的分子调控分析
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批准号:30571333
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项目类别:面上项目
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资助金额:25.0万元
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批准年份:2005
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负责人:曾申明
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依托单位:
体外操作对牛胚胎IFN-t基因活性影响的研究
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批准号:30100133
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项目类别:青年科学基金项目
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资助金额:17.0万元
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批准年份:2001
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负责人:曾申明
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依托单位:
国内基金
海外基金