P16、RASSF1A基因甲基化与肺癌及烟焦油相互关系研究

本项目（1）采用MSP法检测汉族正常人和肺癌患者各130例的血液标本中p16、RASSFlA两种基因启动子区甲基化状态。结果显示：130例肺癌患者血液样品中分别发现51例(39.2 %) p16基因启动子异常甲基化和56例(43.07 %)RASSF1A基因启动子异常甲基化，130例正常对照血液组检测到p16、RASSF1A基因启动子的异常甲基化分别2例（1.53 %）和1例（0.77 %），差异有统计学意义，P<0.001 。其次对肺癌患者p16和RASSF1A基因甲基化与吸烟的关系进行了分析，结果表明：p16和RASSF1A基因甲基化水平有升高趋势，但没有统计学意义；另外，对单基因与多基因联合检测做了对比研究，结果显示单独检测p16、RASSF1A基因启动子区异常甲基化敏感性分别为39.23%和43.07%，联合两个基因检测用于诊断肺癌的敏感性提高到55.38%，较单个基因检测有所提高，多项指标联合检测可提高检测的灵敏度和阴性预测值。（2）采用MSP法检测不同浓度的B(a)P对原代大鼠气管-支气管上皮细胞p16、RASSF1A基因启动子区甲基化程度的影响。结果显示：0.l、l.0、10µmol/L三个浓度B(a)P分别作用大鼠气管-支气管上皮细胞24、48、72h后，p16、RASSF1A基因启动子区均未发生甲基化，并通过测序验证。（3）采用Meta-analysis方法研究p16、RASSF1A基因甲基化与中国人群肺癌易感性的关系。①Meta-analysis结果显示：纳入国内外关于p16基因甲基化与肺癌易感性关系标准的文献10篇，共有549例NSCLC患者，对照组513例。p16基因甲基化病例组与对照组的比值比(OR)为6.76，95%CI为(4.79%~9.54%)，差异有统计学意义(P<0.05)。②纳入国内外关于RASSF1A基因甲基化与肺癌易感性关系标准的文献8篇，共777例NSCLC患者，对照组596例。RASSF1A基因甲基化病例组与对照组的比值比(OR)为4.46，95%CI为(3.35%~5.94%)，差异有统计学意义(P<0.05)。(4)采用焦磷酸测序法检测被动吸烟对小鼠肺组织中p16、RASSF1A基因甲基化的影响程度, 结果显示：空白、低剂量、中剂量、高剂量组均未检测出p16、RASSF1A基因甲基化。