抑癌基因RASSF10通过外泌体调控破骨细胞功能在生长激素腺瘤骨质侵袭中的作用和机制研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81702643
项目类别：
青年科学基金项目
资助金额：
19.0万
负责人：
彭浒
依托单位：
中国人民解放军第二军医大学
学科分类：
H1808.肿瘤微环境
结题年份：
2020
批准年份：
2017
项目状态：
已结题
起止时间：
2018-01-01 至2020-12-31

项目参与者：
吴建；杨明金；徐亚平；程寅；刘泓毅；梁才全；卢晓清；徐赫；赵煜；
关键词：
抑癌基因RASSF10 破骨细胞生长激素腺瘤其他内分泌肿瘤侵袭性行为

项目摘要

The aggressive behavior of pituitary adenomas to surrounding structures is the reason of their recurrence. Growth hormone-releasing (GH) adenoma or somatotroph adenoma is a frequent category of pituitary adenomas. In our previous study, we found that the silencing by promoter hypermethylation of a new tumor suppressor gene RASSF10 was associated with bone invasion and osteoclast aggregation and activation. However, the mechanism of this phenomenon is not clear. We propose a hypothesis that the silencing by promoter hypermethylation of RASSF10 might induce overexpression of MDM2, then aggregate and promote monocytes's differentiation to osteoclast through tumor-drived exosomes. In this study, we are going to overexpress or konck-down RASSF10 and MDM2 in GH adenomas cell lines, research the effect of RASSF10, MDM2 and tumor-drived exosomes in osteoclast aggregation, proliferation and activation. We will also study the aggression-related marker of tumor-drived exosomes. This study will illuminate the effect of RASSF10 epigenetic silencing on the biological behavior of GH adenomas, and offer a new way to analyze the clinical prognosis and early diagnosis of invasive pituitary adenomas, and reduce the recurrence rate of this disease.

垂体生长激素（GH）腺瘤对周围结构的侵袭，导致其难以被彻底切除，是其易复发的原因。前人研究发现，新抑癌基因RASSF10的异常甲基化能够促进MDM2表达，可能通过影响外泌体的分泌和组成，调控肿瘤微环境，但其具体机制目前尚未见报道。课题组前期研究发现，在人GH腺瘤中， RASSF10高甲基化导致其表达下调，与破骨细胞聚集活化和肿瘤侵袭性分级密切相关。因此，研究组提出科学假说：侵袭性垂体GH腺瘤中RASSF10因高甲基化沉默，导致MDM2表达增高，通过外泌体向单核细胞传递，诱导其聚集并分化为破骨细胞，引起GH腺瘤骨质侵袭。本课题拟构建RASSF10和MDM2基因不同表达水平的GH腺瘤细胞系，在体内和体外研究RASSF10、MDM2通过外泌体调控单核-破骨细胞功能在GH腺瘤骨质侵袭中发挥作用的机制，进一步探索参与其中的外泌体信号通路，为侵袭性垂体腺瘤的早期诊断、预后评估和治疗提供新的思路。

结项摘要

背景：垂体生长激素腺瘤侵袭到周围组织中，对手术中的完全切除提出了挑战，这是这种类型癌症复发的主要原因。研究表明，RASSF10的异常甲基化可通过影响外泌体的分泌来促进MDM2的表达并调节肿瘤的微环境。在本研究中，我们旨在揭示这种效应的具体潜在机制。..方法：使用GT1.1细胞或外泌体和RAW264.7细胞进行Transwell共培养测定。收集RAW264.7细胞用于侵袭，增殖和凋亡测定，RT-qPCR和蛋白质印迹。进行了RNA-seq，并用于评估GT1.1细胞外来体对RAW264.7细胞的影响的潜在分子途径。..结果： RASSF10表达降低的GT1.1细胞可以促进RAW264.7细胞的增殖和迁移，并促进破骨细胞标记TRAP和CK的表达。GT1.1细胞外来体对RAW264.7细胞表型的影响已通过RASSF10-MDM2途径实现。RNA-seq可以鉴定PI3K-AKT，MAPK和钙信号在该RASSF10-MDM2调控系统中至关重要。..结论：我们的结果表明GT1.1细胞通过RASSF10-MDM2途径激活PI3K-AKT，MAPK和钙信号传导，并通过外泌体促进RAW264.7细胞分化为破骨细胞。这项研究可能会提供新的思路，以帮助侵袭性垂体腺瘤的早期诊断，预后评估和治疗。