在玉米的三种主要细胞质雄性不育类型中，C型胞质雄性不育是一种重要的不育类型，其育性受两对重叠恢复基因控制，其中恢复主基因Rf4可以恢复任何一种遗传背景的C型不育系，在生产上具有重要的应用价值，对其进行克隆及功能分析是阐明恢复基因基因和细胞质基因相互作用分子机理的主要手段。在植物基因克隆的策略中，转座子标签法是克隆玉米基因的一种有效方法，但是传统的转座子标签法程序繁琐、工作量大，需要对其进行改进以提高基因克隆的效率。本项目拟利用Mu转座子插入的方法筛选恢复基因Rf4的突变体；利用改良AFLP的方法获得恢复基因Rf4的部分侧翼序列；通过野生型BAC文库的筛选及亚克隆文库的构建与序列分析，对恢复基因Rf4进行克隆。该项研究不仅可以为玉米C型胞质雄性不育的利用提供理论依据，同时可以为玉米重要基因的克隆提供一种有效的技术平台。