本研究以喉癌细胞高增殖亚群为研究对象，进行Bmi-1与喉癌细胞增殖和衰老相关性的系列性研究。本实验成功构建了双启动子PFIV-H1/U6 Bmi-1 siRNA表达载体，选择抑制效果最好的重组质粒（Bmi-1siRNA-703）进行后续实验。RT-PCR和Western-blot证实实验组（Bmi-1siRNA质粒转染组）P16基因相对表达水平增高(P<0.01)；细胞生长曲线及克隆形成能力显示，实验组细胞的增殖受到抑制，与空白组（CD44+CD133+细胞）和阴性对照组（GFP-siRNA）比较，差异有统计学意义(P<0.01)；DAPI法和流式细胞仪检测显示实验组细胞凋亡率明显高于空白组和阴性对照组，差异有统计学意义(P<0.01)；Transwell小室体外侵袭实验显示实验组细胞体外侵袭能力降低，实验组穿膜细胞（65±11.8）与阴性对照组（83±6.5）及空白对照组（88±9.7）相比明显减少(P<0.05)；联合应用重组载体及化疗药物(5-FU)后细胞早熟衰老状态的检测：β-半乳糖苷酶的活性检测结果示：Bmi-1 siRNA 治疗组、Bmi-1 siRNA联合应用5-FU组、5-FU治疗组中SA-β-Gal的活性均较强,异染色质聚集现象（SAHF）结果示：Bmi-1 siRNA联合应用5-FU组SAHF现象最为明显。凋亡因子检测结果示：Bmi-1 siRNA 组、Bmi-1 siRNA 联合5-FU 组、5-FU组均表现为bcl-2和caspase-3蛋白水平高表达，以Bmi-1 siRNA 联合5-FU 组最为显著。体内实验结果示：Bmi-1siRNA 组成瘤时间明显延长，所形成的肿瘤与阴性对照组和空白组接种形成的肿瘤相比，生长速度明显减慢，体积也明显减小，差异具有显著性（P<0.05）。Bmi-1沉默对5-FU治疗组移植瘤生长的影响：Bmi-1 siRNA＋组肿瘤重量与PBS对照组相比明显下降，肿瘤抑制率为63.3％，而Bmi-1 siRNA组和单纯5-FU组的肿瘤抑制率分别为35.7％和37.8％。TUNEL 法检测Bmi-1 siRNA组和Bmi-1 siRNA +5-FU组凋亡信号明显增多.本研究证实抑制Bmi-1表达可以特异性诱导喉癌细胞中的高增殖亚群降低自我更新能力，并诱导其进入早熟衰老状态，同时联合化疗药物5-Fu可以起到化疗增敏的作用。