温阳健脾法通过CREB/lnc-TMEM44/TLR4信号轴调控复发性流产的母胎免疫耐受能力的机制研究
批准号:
82060882
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
姜丽娟
依托单位:
学科分类:
中医妇科学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
姜丽娟
中文摘要
复发性流产(RSA)是育龄期妇女妊娠常见的并发症之一,发病率呈逐年上升趋势,该病已从医学问题上升到影响社会稳定的严重问题。前期研究发现,温阳健脾法对RSA具有较好的临床疗效,前期研究发现保胎饮能调控Th17/Treg细胞平衡介导正常妊娠免疫耐受。但其本课题拟以CREB/lnc-TMEM44/TLR4信号轴为切入点,通过构建CBA/J×DBA/2小鼠RSA模型和CREB/lnc-TMEM44/TLR4信号轴基因细胞体外诱导分化模型,检测TCREB/lnc-TMEM44/TLR4信号轴细胞因子水平、基因表达、信号传导通路蛋白表达,研究温阳健脾法通过影响CREB/lnc-TMEM44/TLR4信号轴治疗RSA母-胎免疫耐受作用机制,以期为中药复方保胎饮治疗RSA的临床应用提供科学依据,为后续的新药研发奠定科学基础。
英文摘要
Recurrent Spontaneous Abortion(RSA) is a complicated disease in women of reprouductive age, and its morbidity rate is on rising year by ear.It has become a urgent problem, which is harmful to social stability. According to previous researches, significant efficacy of warming yang and strengthening spleen approch on RSA in clinical study are observed, however, detailed mechanisms of action are not investigated. Recent studies have new opinions that the balance of CREB/lnc-TMEM44/TLR4 signal axis cells is closely related to normal gestation immune tolerance, therefore, we put forward the hypothesis that Bao Tai Yin possess a satisfactory effect in treating RSA may mediate by regulation of CREB/lnc-TMEM44/TLR4 signal axis blance. In this research, in vivo CBA/J×DBA/2 mice RSA model and in vitro CREB/lnc-TMEM44/TLR4 signal axis differentiation model are established. CREB/lnc-TMEM44/TLR4 signal axis and their specific transcription factor and protein expressions are investigated. The theory that warming yang and strengthening spleen approch affects CREB/lnc-TMEM44/TLR4 signal axis to prevent RSA caused by maternal –fetal immune tolerance will be tested, which will provide scientific evidences for herbal compound Bao Tai Yin. Moreover, informations about new drug research and development in treating RSA will be provided.
1.项目背景.本项目聚焦于复发性流产(RSA)的发病机制及中药治疗策略。RSA是常见的妊娠并发症,严重影响妇女的生殖健康及家庭稳定。尽管现代医学已取得一定进展,但RSA的确切病因尚未完全阐明,且现有治疗手段有限。因此,探索新的治疗策略,特别是基于中医药理论的治疗方法,具有重要的临床和科研价值。.2.主要研究内容.(1)临床研究:验证地屈孕酮联合益肾固胎颗粒对RSA患者的临床疗效,观察其对患者症状、激素水平及保胎率的影响。.(2)动物实验:构建RSA小鼠模型,研究温阳健脾方对模型小鼠胚胎吸收率、外周血和蜕膜组织中CREB表达及Th17/Treg平衡的影响;预测与CREB结合的LncRNA,通过qPCR 确认lncRNA TMEM44-AS1 与 lncRNA XIST 在临床样本中的表达,通过慢病毒转染敲低HTR-8/Svneo细胞中LncRNA XIST 的表达,验证LncRNA XIST 在细胞增殖,凋亡,侵袭,炎症因子释放,以及下游蛋白POU2F1和NF-κB信号通路相关蛋白P65、IkB-α、IKKβ的蛋白表达及其磷酸化情况。.(3)分子机制研究:通过体外细胞实验和网络药理学,探究温阳健脾方及其关键成分槲皮素通过CREB/TLRs分子轴调节Th17/Treg平衡的机制,以及槲皮素对IGF2的调控作用。.3.重要结果及关键数据.(1)临床研究:地屈孕酮联合益肾固胎颗粒能显著改善RSA患者的临床症状,提高血清孕酮和血HCG水平,保胎率显著高于单用地屈孕酮组。.(2)动物实验:温阳健脾方能显著降低RSA小鼠模型的胚胎吸收率,调节外周血和蜕膜组织中CREB的表达及Th17/Treg平衡,抑制TLRs/MyD88/NF-kB信号转导通路。.(3)分子机制研究:发现lncRNA XIST在RSA中高表达,敲低其表达可增强细胞活力,降低炎症因子水平和细胞凋亡率,增加细胞侵袭数。网络药理学预测IGF2为关键节点,槲皮素通过抑制IGF2表达,调控ERK通路,降低Th17细胞比例,诱导T细胞向Treg分化。.科学意义. 本项目不仅验证了地屈孕酮联合益肾固胎颗粒对RSA患者的临床疗效,还深入探讨了温阳健脾方及其关键成分槲皮素通过CREB/TLRs分子轴调节Th17/Treg平衡的机制,为RSA的治疗提供了新的思路和方法。
温阳健脾方通过lncRNA XIST/miR-545-5p/POU2F1分子轴调控NF-κB通路防治复发性流产(RSA)的机制研究
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批准号:82460950
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:32.00万元
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批准年份:2024
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负责人:姜丽娟
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依托单位:
基于Th17/Treg细胞平衡研究温阳健脾方治疗复发性流产母-胎免疫耐受作用机制
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批准号:81560785
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项目类别:地区科学基金项目
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资助金额:38.0万元
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批准年份:2015
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负责人:姜丽娟
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依托单位:
国内基金
海外基金