miR-130b靶向MSTN基因调节梅山猪肌内脂肪沉积的作用研究

批准号:
31501923
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
潘士锋
依托单位:
学科分类:
C1702.家畜种质资源与遗传育种学
结题年份:
2018
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
邢华、孙敬、王东、杨晋娴、董轩
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中文摘要
肌内脂肪(IMF)含量是影响猪肉品质的最重要因素,在基因水平研究肌内脂肪生成的调控机理是改善猪肉品质的根本途径之一。人、鼠上研究发现,MSTN对调节IMF沉积起重要作用。然而,MSTN在调控猪IMF沉积中的作用还不清楚。我们前期发现,miR-130b可减少梅山猪皮下脂肪沉积,并且通过生物信息学软件预测显示miR-130b与MSTN之间具有很强的靶向关系。然而,miR-130b能否靶向MSTN调控梅山猪IMF沉积还需要进一步研究。本研究首先通过双荧光素酶报告基因系统、“过表达”和“干扰”等方法确认miR-130b与MSTN之间靶向关系,然后以肌内脂肪细胞为模型,重点研究miR-130b和miR-130b-MV介导MSTN对猪IMF沉积的调节作用。通过本研究可明确miR-130b所介导的MSTN对猪IMF沉积的调节作用,为进一步提高猪肉中IMF含量进而改善猪肉品质提供理论依据。
英文摘要
With the improvement of people's living standard, the pork quality has aroused wide attention of producers and consumers, and the concent of intramuscular fat (IMF) is the most important factor that influences the quality of pork. Research of the regulation mechanism of pig intramuscular fat deposition is one of the fundamental way to improve the pork quality. Recent studies have found that MSTN (myostatin), a negative regulatory factor of skeletal muscle growth, plays an important role in intramuscular fat deposition. However, whether miRNAs can regulate pig IMF deposition through MSTN is still unknown. .In our previous study, we found that miR-130b can reduce subcutaneous fat deposition of pigs by inhibiting its target gene ppar-gamma expression, we also found that miR-130b was one of the strong target of MSTN through bioinformatics software prediction. However, whether miR-130b can regulate MSTN at the post-transcription level and affect intramuscular fat deposition of pigs still needs further study. Our present study aims to:(1)clarify the special roles of MSTN in the porcine intramuscular fat deposition and explore the possible post-transcription mechanism mediated by miR-130b, (2) explore the regulation role of MV delieved miR-130b (miR-130b-MV) in MSTN expression and demonstrate the effect of miR-130b-MV in the regulation of porcine intramuscular fat deposition by targeting MSTN in in vivo and in vitro models..Through our present study, we can further know the special role of MSTN in regulating the pig intramuscular fat deposition and the post-transcription mechanism mediated by miR-130b, secondly, we can discuss whether MV can be used as efficient delivery vehicle of miR-130b. Our results will further improve the IMF content in pork and provide certain theoretical basis for improving the quality of pork.
肌内脂肪(IMF)含量是影响猪肉品质的最重要因素之一。在基因水平上研究猪肌内脂肪生成的调控机理是改善猪肉品质的根本途径之一。本研究以新生梅山仔猪背最长肌源肌内脂肪细胞去分化的DFAT细胞为模型,在诱导分化的同时进行不同浓度的重组人MSTN蛋白(0,25,50和100 ng/mL)处理,探讨MSTN对猪DFAT成脂分化的影响及其分子机制,尤其深入研究了MSTN和miR-130b之间的靶向调控关系,并在细胞和在体水平进一步探讨了miR-130b对脂肪沉积的调控作用及机制。结果表明,与0 ng/mL MSTN处理组相比,25,50和100 ng/mL MSTN均能不同程度的抑制DFAT的成脂分化,TG沉积量显著减少,且呈剂量依赖性,另外发现该作用是通过抑制脂肪细胞分化过程中关键的转录因子之一PPAR-γ的表达,并进而加速脂肪的分解和抑制脂肪的合成实现的。此外,与0 ng/mL MSTN处理组相比,25,50和100 ng/mL MSTN均能不同程度的促进DFAT细胞中miR-130b的表达。通过双荧光素酶报告基因检测并结合“种子序列”突变法,进一步阐明miR-130b与PPAR-γ之间有很强的靶向关系。通过“过表达”和“干扰”法进一步探讨了miR-130b对猪IMF沉积的影响及其分子机制,并以高脂日粮诱导的肥胖小鼠为模型在在体水平上进行了深入验证。结果表明,与miR-SC-DEX组细胞相比,miR-130b-DEX处理对细胞活力无显著影响,但显著降低了TG含量和PPAR-γ的表达,而miR-130b-Inhibitor-DEX细胞则呈现相反的结果。此外,与miR-SC-DEX细胞相比,miR-130b-DEX处理显著降低了PPAR-γ下游因子Perilipin1及脂肪合成基因如FAS,ACC,11β-HSD1和FTO的表达,并显著增加了HSL和ATGL的表达和酶活。在体结果表明,尾静脉注射miR-130b-MV能通过抑制PPAR-γ的表达,抑制附睾脂肪沉积,扭转高脂日粮所导致的小鼠肥胖。总之,本研究结果阐明了MSTN对猪IMF沉积的影响及其分子机制,并探讨了MSTN和miR-130b在猪IMF沉积过程中的“对话”机制,揭示了MSTN/miR-130b/PPAR-γ信号通路在猪IMF沉积中的调控作用,从而为筛选调控猪IMF沉积的主要分子靶点,实现猪肉品质的调控提供理论支撑。
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Association of VLDLR haplotypes with abdominal fat trait in ducks
鸭 VLDLR 单倍型与腹部脂肪性状的关联
DOI:10.5194/aab-60-175-2017
发表时间:2017-06
期刊:ARCHIVES ANIMAL BREEDING
影响因子:1.8
作者:Pan Shifeng;Wang Cong;Dong Xuan;Chen Mingliang;Xing Hua;Zhang TJ
通讯作者:Zhang TJ
DOI:--
发表时间:2016
期刊:畜牧与兽医
影响因子:--
作者:潘士锋;臧矫;薛莹;董轩;王焱;邢华
通讯作者:邢华
DOI:--
发表时间:--
期刊:畜牧与兽医
影响因子:--
作者:伏智亮;沈如玉;王绮绮;崔忆馨;张琳;邢华;潘士锋
通讯作者:潘士锋
DOI:--
发表时间:2017
期刊:畜牧与兽医
影响因子:--
作者:潘士锋;崔忆馨;张杭;管飘萍;袁嘉晟;邢华
通讯作者:邢华
DOI:--
发表时间:2018
期刊:畜牧与兽医
影响因子:--
作者:袁嘉晟;沈如玉;贺婷婷;高昕星;邢华;潘士锋
通讯作者:潘士锋
ERK和cAMP-PKA信号通路互作在Myostatin/miR-130b/PPAR-γ轴调控梅山猪肌内脂肪沉积中的作用与机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58万元
- 批准年份:2020
- 负责人:潘士锋
- 依托单位:
国内基金
海外基金
