播娘蒿CBF作为冷胁迫早期预警信号分子在抗寒机制中的作用

本课题通过比较研究播娘蒿与转基因植株在冷刺激下的DsCBF的时空表达；局部冷刺激对整个植株DsCBF表达的影响；局部冷刺激对整个植株的DsCBF的下游基因的表达情况，确定DsCBF的系统诱导表达情况，确定DsCBF作为植物体内的冷响应信号分子的预警机制；并研究作为冷响应信号分子的CBF的多态性对植物耐寒性的影响。首次克隆获得播娘蒿DsKIN1基因全长。通过对播娘蒿局部和整体冷诱导研究发现，局部冷诱导播娘蒿CBF可作为信号因子向局部未诱导部位传递。在播娘蒿CBF低温响应信号途径中，确定了未受到冷胁迫部位可以收到远端的冷胁迫信号，并导致局部处理未受胁迫的叶片生理指标发生变化，说明未受到冷胁迫部位可以收到远端的冷胁迫信号，启动冷响应基因的表达。成功找到2个影响播娘蒿DsCBF1结合冷响应基因启动子区域的重要氨基酸位点。结合SOE-PCR定点突变方法和化学发光法EMSA分析播娘蒿CBF顺式调控因子和DNA探针的结合情况。确定DsCBF作为植物体内的冷响应信号分子的预警机制；并研究作为冷响应信号分子的CBF的多态性对植物耐寒性的影响。