播娘蒿CBF和COR抗寒基因结构及表达与其抗寒性

播娘蒿与拟南芥同属十字花科，抗寒性却比拟南芥强的多，可在0℃下抽苔开花，种子能在－40℃下生长。本课题组已从播娘蒿中克隆获得CBF和COR15a基因，生物信息分析两者具有主要抗寒CBF-COR抗寒系统显示：播娘蒿COR15a基因较具有更多的跨膜区域；CBF基因在酸性活化区的二级结构分布不同，这些差异可能是造成播娘蒿拥有更强抗寒能力的原因。本项目拟将播娘蒿和拟南芥的CBF和COR基因转入拟南芥CBF和COR的缺失突变株中进行功能互补实验，通过荧光定量PCR、Western杂交及耐寒性生理指标测定，从mRNA、蛋白及生理水平比较两个物种CBF和COR基因的表达与耐寒性之间的关系，确定它们抗寒性的差异是由抗寒相关基因的表达量的差异，还是由基因结构不同所造成的；并采用原生质体转录激活实验确定拟南芥和播娘蒿CBF基因与COR 5端调控序列相互作用调控抗寒功能强弱。为深入研究播娘蒿抗寒机制奠定基础。