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利用RNAi技术创制兼抗PVX,PVY,PLRV和PVS马铃薯新种质
结题报告
批准号:
31360353
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
45.0 万元
负责人:
齐恩芳
依托单位:
学科分类:
C1307.作物基因组及遗传学
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
文国宏、李建武、张荣、崔文娟、陈晓艳
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中文摘要
马铃薯在生长期间容易受多种病毒的危害,病毒侵染造成马铃薯种质退化,产量降低,品质变劣。PVX、PVY、PLRV、PVS引起的病害是造成我国马铃薯退化的重要原因,严重危害马铃薯生产,尤其是2种甚至多种病毒混合侵染带来的损失远大于各病毒单独侵染。利用病毒来源的基因获得抗性转基因植物是植物抗病毒基因工程的重要途径,传统方法较难获得对相关病毒产生免疫的植株,而RNAi能够有效阻止病毒侵入,是一种更加有效、安全的提高对病毒抗性的途径。本研究拟利用RNA干扰技术,构建四种病毒外壳蛋白基因片段的融合基因,进而构建融合基因反向重复序列的表达载体,通过农杆菌介导法转化马铃薯,以期借助基因工程的方法,增强植株对病毒的抗性,培育同时抗PVX、PVY、PLRV、PVS的马铃薯植株,探索一条获得多免疫的抗病毒转基因马铃薯的有效途径。
英文摘要
Potatoes are easy to be harmed by multiple viruses in the growth period, that caused potato germplasm degradation, production drawdown, and worse quality. The diseases caused by PVX, PVY, PLRV,PVS are important reasones of degradation and reduction of output in potato. Especially, the damages of multiple infections are far greater than that causing by single infection. In antiviral plant gene engineering, it is a important way to get resistance transgenic plants using the genes from viruses, because traditional methods are harder to get to immune plant to related viruses. But, RNA interference (RNAi) technique can effectively prevent invades form virus, and is a more effective and safe way to improve the virus-resistance. In this study, we will construct a fusion gene of the shell protein gene segments form PVX PVY, PLRV, and build its expression vectors of inverted repeat sequence by RNAi technique, and then transform potatoes by agrobacterium-mediated approach in order to improve the resistance to viruses in potato. Our Our goal was to obtain transgenic potato strain with multiple resistant characters to PVX, PVY, PLRV and PVS viruses.
马铃薯是一种重要的全球性经济作物,马铃薯病毒是引起马铃薯退化的重要原因。马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯潜隐花叶病毒(PVS)在马铃薯生产中危害严重、分布广泛并普遍混合发生,是严重危害我国马铃薯产量的4种主要病毒。本研究分别克隆了4种病毒CP基因及其相对保守区段约300 bp大小的基因片段,构建了四种病毒外壳蛋白基因片段的融合基因植物表达载体pART27-XSYV-rh,进而构建融合基因反向重复序列植物表达载体pBI121-pRH。通过农杆菌介导法转化易感病毒马铃薯品种‘陇薯11号’, Kan筛选得到47个转pART27-XSYV-rh株系和20个转pBI121-pRH株系,经PCR、PCR-Southern杂交分析及qRT-PCR检测,证明外源基因以不同拷贝数整合到‘陇薯11号’马铃薯基因组中,不同转基因植株中病毒 RNA 的积累量有差异。在温室对转基因无性扩繁后代植株采用PVX、PVY、PLRV、PVS混合攻毒,攻毒后用ELISA法检测抗病性,结果显示转pBI121-pRH株系和转pART27-XSYV-rh株系均可获得对4种病毒侵染表现免疫的植株,但转pBI121-pRH株系的抗病程度较高。本研究表明RNAi能够有效阻止病毒侵入,是获得多免疫的抗病毒转基因马铃薯的有效途径,利用RNAi技术可筛选出多抗病毒转基因马铃薯新种质,为马铃薯抗病育种工程提供良好的亲本材料。
期刊论文列表
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DOI:--
发表时间:2016
期刊:中国马铃薯
影响因子:--
作者:陈晓艳;孟亚雄;贾小霞;张武;刘石;郭玉美;齐恩芳
通讯作者:齐恩芳
DOI:--
发表时间:2015
期刊:干旱地区农业研究
影响因子:--
作者:胡新元;龚成文;王一航;李建武
通讯作者:李建武
DOI:--
发表时间:2017
期刊:广西植物
影响因子:--
作者:陈晓艳;孟亚雄;贾小霞;张武;刘石;郭玉美;齐恩芳
通讯作者:齐恩芳
Overexpression of the Arabidopsis DREB1A gene enhances potato drought-resistance
拟南芥DREB1A基因的过度表达增强马铃薯的抗旱性
DOI:10.1134/s1021443716040063
发表时间:2016-07-01
期刊:RUSSIAN JOURNAL OF PLANT PHYSIOLOGY
影响因子:1.4
作者:Jia, X. X.;Li, Y. T.;Wang, W. T.
通讯作者:Wang, W. T.
DOI:--
发表时间:2015
期刊:中国马铃薯
影响因子:--
作者:齐恩芳;王一航;文国宏;贾小霞
通讯作者:贾小霞
马铃薯块茎形成应答高温胁迫miRNAs鉴定及分子调控机制研究
  • 批准号:
    32260480
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    33万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    齐恩芳
  • 依托单位:
马铃薯花色素苷合成相关miRNAs的发掘及其功能鉴定
  • 批准号:
    31860401
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    40.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    齐恩芳
  • 依托单位:
国内基金
海外基金