本项目按照申请要求对肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，Mp）重组MPN668蛋白（rMPN668）是否具有降解有机氢过氧化物（Organic Hydroperoxide，OHP）的能力，并对其结构进行了初步探讨。首先，采用分子克隆和蛋白表达、纯化等方法获得了高纯度的肺炎支原体MPN668蛋白。结果显示，降解有机氢过氧化物叔丁基过氧化氢（tert-butyl hydroperoxide，t-BHP）以及无机H2O2，其降解能力与rMPN668浓度呈正相关；催化t-BHP时，20ng/μL rMPN668在2min内降解约500μM t-BHP，而催化H2O2反应时，催化效率远低于此水平，200ng/μL rMPN668降解500μM H2O2需要35min以上。RT-PCR分析表明，Mp在不同浓度的t-BHP(0.05M~1.00M)和氢过氧化枯烯（cumene hydroperoxide，CHP）(0.05M~1.00M)条件下，mpn668基因表达水平随着t-BHP和CHP浓度增大而升高；模拟的分子模型显示，rMPN668的二级结构序列为β1-β2-β3-α1-β4-β5-α2-α3-β6，Cys55可能位于其活性中心内。Cys55错义突变后，表达产物的酶活性几乎丧失。同时，通过采用Tn4001转座子和pIVT-1质粒，成功构建了肺炎支原体ΔMPN668突变株，突变株对3种常见的氧化物存在下，生存能力明显低于野生株，尤其是对t-BHP敏感性显著高于H2O2和CHP，此外，将MPN668基因转化至Ohr突变的铜绿假单胞菌中，结果发现铜绿假单胞菌同时获得了抗氧化能力。以上结果表明rMPN668具有氢过氧化物酶活性，能降解有机及无机氢过氧化物。Cys55可能位于rMPN668的活性中心，在酶促反应中可能发挥关键作用。