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小肽转运体2在前列腺组织中的功能性表达研究
结题报告
批准号:
81072689
项目类别:
面上项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
蒋惠娣
依托单位:
学科分类:
H3510.药物代谢与药物动力学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
方丹波、刘瑶、李丽萍、DavidE·Smith、孙冬黎、潘豪、孙思源、赵鸣
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中文摘要
前列腺腺管上皮"血-前列腺屏障"的存在,限制了药物进入前列腺组织,使前列腺疾病成为世界性治疗难题。研究前列腺组织中转运体的功能性表达,将为前列腺疾病治疗药物的设计提供解决途径。小肽转运体2(PEPT2)是一种高亲和力低容量的转运体,底物谱广,二肽、三肽及拟肽类化合物均可作为其底物。我们前期发现,小鼠前列腺中PEPT2 mRNA及蛋白丰富表达,且可能位于"血-前列腺屏障",但不清楚其在人前列腺中的表达及定位,也不清楚其在介导底物跨"血-前列腺屏障"转运中的作用。本课题首先考察小鼠和人前列腺中4种小肽转运体的表达,明确PEPT2为前列腺中主要的小肽转运体;然后以免疫组化法确证PEPT2是否位于"血-前列腺屏障";并采用PEPT2转基因小鼠、促甲状腺激素及siRNA技术干预,在细胞、组织及整体动物水平进行经典底物摄取/转运研究,阐明前列腺中的PEPT2在介导底物跨"血-前列腺屏障"转运中的作用。
英文摘要
寡肽转运体为质子依赖的一类摄取型转运体,主要包括PepT1、 PepT2、PhT1、PhT2。研究发现,由于“血-前列腺”屏障的存在,使很多药物不能在前列腺组织及腺泡内达到治疗浓度。本项目旨在阐明前列腺中POTs的表达、功能以及在疾病状态下的变化,为前列腺疾病治疗药物设计提供参考。.本课题研究发现PepT2和PhT1的mRNA在前列腺中表达较高,但仅有PepT2蛋白显示免疫条带。进一步研究发现,PepT2主要在前列腺上皮细胞顶侧,在基底细胞中也略有表达;通过考察不同年龄小鼠前列腺组织中PepT2的mRNA和蛋白表达,发现在小鼠发育阶段,PepT2 mRNA和蛋白表达均随周龄增大而增加,成年(8周龄)后趋于平稳,表明PepT2在性成熟的前列腺中发挥作用。人前列腺组织的研究发现,PepT2和PhT2 mRNA表达水平较高,PhT1较低,而PepT1未检测到。通过比较前列腺增生和前列腺癌的临床样本的POTs表达,发现前列腺癌样本中PepT2、PhT1的mRNA和蛋白表达水平均显著低于前列腺增生样本,推测肿瘤环境可能影响PepT2和PhT1的表达。.为阐明前列腺肿瘤中POTs表达的变化是否与炎症有关。我们考察了炎症环境对POTs表达的影响,以致炎因子IFNγ和TNFα诱导刺激细胞产生炎症反应后,检测POTs表达,结果显示IFNγ(50ng/mL)和TNFα(50ng/mL)刺激RWPE-1细胞48小时后,显著诱导PhT2 mRNA表达(P<0.001),但却使PepT2表达降低(P<0.01),而在PC-3细胞中,IFNγ(50ng/mL)和TNFα(50ng/mL)作用48h后,PhT2 mRNA表达均显著增加(P<0.001),但对PepT2和PhT1的表达无显著影响(P>0.05)。PhT2在RWPE-1和PC-3细胞中的基础表达均较低,而致炎因子的刺激作用显著诱导了PhT2的表达,表明炎症因子显著上调PhT2表达,提示其在细胞免疫应激中可能有重要作用。.此外,在本基金资助下,我们还发现了脾脏中上述四种POTs的表达,明确了巨噬细胞中PepT2的表达显著高于淋巴细胞,而PhT2在两种细胞均有表达,进一步阐明了PepT2而非PhT2介导巨噬细胞中寡肽跨膜转运,在巨噬细胞NOD1信号通路中发挥重要作用。上述结果,为进一步深入研究POTs 在免疫系统中的作用奠定了基础。
期刊论文列表
专著列表
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专利列表
Expression of proton-coupled oligopeptide transporter (POTs) in prostate of mice and patients with benign prostatic hyperplasia (BPH) and prostate cancer (PCa)
质子偶联寡肽转运蛋白(POT)在小鼠前列腺以及良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)患者中的表达
DOI:10.1002/pros.22568
发表时间:2013-02-15
期刊:PROSTATE
影响因子:2.8
作者:Sun, Dongli;Tan, Fuqing;Jiang, Huidi
通讯作者:Jiang, Huidi
DOI:--
发表时间:2012
期刊:Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences
影响因子:--
作者:孙冬黎;蒋惠娣;曾苏
通讯作者:曾苏
DOI:--
发表时间:2011
期刊:Chinese Pharmaceutical Journal
影响因子:--
作者:孙冬黎;曾苏;蒋惠娣
通讯作者:蒋惠娣
DOI:--
发表时间:2013
期刊:Chinese Pharmaceutical Journal
影响因子:--
作者:戴燕清;涂美娟;孙冬黎;石爱琴;曾苏;蒋惠娣
通讯作者:蒋惠娣
DOI:10.1021/mp300700p
发表时间:2013-04-01
期刊:Molecular pharmaceutics
影响因子:4.9
作者:Sun D;Wang Y;Tan F;Fang D;Hu Y;Smith DE;Jiang H
通讯作者:Jiang H
基于单羧酸转运体 1/4 的乳酸化修饰调控在慢 性肾病中的作用研究
  • 批准号:
    Z24H310002
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2024
  • 负责人:
    蒋惠娣
  • 依托单位:
卡培他滨及其代谢物调控烟酰胺摄取转运体致手足综合征研究
  • 批准号:
    82373941
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    49万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    蒋惠娣
  • 依托单位:
基于心肌摄取型转运体选择性抑制减轻阿霉素心脏毒性研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    56万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    蒋惠娣
  • 依托单位:
基于OCTN2调控机制的新型非典型抗精神病药物致脂代谢异常研究
  • 批准号:
    81773804
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    59.5万元
  • 批准年份:
    2017
  • 负责人:
    蒋惠娣
  • 依托单位:
寡肽/组氨酸转运体介导细菌肽聚糖降解产物跨溶酶体转运致炎症性肠病研究
  • 批准号:
    81573492
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    65.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    蒋惠娣
  • 依托单位:
OCT1/MATE1转运体介导吡咯里西啶生物碱的肝脏摄取及转运研究
  • 批准号:
    81373474
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    75.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    蒋惠娣
  • 依托单位:
国内基金
海外基金