丝状真菌蛋白分泌途径中非折叠蛋白应答机制的研究

曲霉属丝状真菌具有高效分泌蛋白能力，是生产重组蛋白的理想宿主，但相比同源蛋白，异源蛋白产量仍然很低，其主要瓶颈在于蛋白翻译后的修饰和运输。分泌蛋白首先在内质网提供的氧化环境中及分子伴侣和折叠酶辅助下进行折叠和修饰，但异源蛋白过量表达导致内质网中非折叠蛋白积累。内质网在应激条件下可通过诱导非折叠蛋白应答（UPR)机制调节保持的自体状态的稳定。本项目以米曲霉模式菌为研究对象，通过外源蛋白的过量表达和化学阻断剂诱导其内质网的UPR机制，分析UPR机制所触发的与蛋白折叠、分泌和降解相关的基因表达调控，探索丝状真菌蛋白分泌机制。并采用固体培养专一性表达启动子下过量表达外源蛋白和表达组成型HAC1基因mRNA非常规剪切的成熟体的方法，探讨丝状真菌固体培养方式下诱导UPR机制，与液体培养条件下比较，研究生长表型的不同对蛋白分泌机制的影响。本课题对优化丝状真菌蛋白分泌途径、生产重组蛋白有着重要意义。