免疫促凋亡蛋白对HER2阳性Herceptin耐药肿瘤及转移性乳腺癌杀伤作用的研究

本研究中构建了含有三种Furin酶切位点的不同转位肽编码区：1）PE（273-282 aa）；2）DT（187-196 aa）；3）9聚精氨酸的重组Immuno-tbid基因，分别命名为e23sFv-fPEBid，e23sFv-fDTBid和e23sFv-9RBid，将其瞬时转染HER2阳性肿瘤细胞人乳腺癌SKBR-3细胞和人胃癌SGC7901细胞，转染72h细胞计数和MTT实验证实，三种免疫促凋亡分子均可以抑制HER2阳性肿瘤细胞的生长，其中以e23sFv-fDTBid的杀伤作用较强。由于免疫促凋亡蛋白在内吞体被Furin切割后，促凋亡分子从内吞体释放入胞浆才能发挥杀伤作用，已知流感病毒血凝素HA2结构域能够破坏内吞体膜稳定性，有利于内吞体中的物质释放入胞浆，因此，我们将HA2与免疫促凋亡分子e23sFv-fDTBid融合，构建了e23sFv-fdt-HA2-tBid和e23sFv-fdt-tBid-HA2两种新型免疫促凋亡分子。同时，建立了Herceptin耐药细胞株和乳腺癌肺转移细胞株，体外细胞学实验证实这两种新型免疫促凋亡分子可以抑制Herceptin耐药细胞株和乳腺癌肺转移细胞株的生长并诱导其凋亡，其中以e23sFv-fdt-tBid-HA2的作用较强。建立乳腺癌肺转移小鼠模型，用这两种新型免疫促凋亡蛋白进行治疗，结果证实这两种新型免疫促凋亡蛋白均能抑制肿瘤的生长，延长小鼠生存期，其中以e23sFv-fdt-tBid-HA2的抑瘤效果最好。.综上所述，通过本研究获得了能用于Herceptin耐药肿瘤和乳腺癌肺转移治疗的新型免疫促凋亡分子e23sFv-fdt-tBid-HA2，该研究使免疫促凋亡分子具有更广阔的应用前景，同时为Herceptin耐药肿瘤及乳腺癌肺转移肿瘤的治疗提供新的策略。