乙型肝炎病毒影响到超过3亿人的健康，每年约有100万人死于乙肝相关疾病。目前对付HBV感染主要依赖干扰素和核酸类似物，但存在副作用较大、病毒变异逃逸等问题。因此，新的治疗手段和新型药物的开发具有重要意义。RNA干扰在慢性病毒感染的治疗方面有着极大的应用前景，是HBV治疗的一种潜在的具有发展价值的方式，但目前仍然存在很多问题和障碍，包括siRNA在血液中的稳定性和半衰期、细胞对siRNA的摄入效率、siRNA的脱靶效应以及siRNA的靶向转运等等。其中最重要的一点就是如何将siRNA有效地转运到其作用部位，合适的转运载体对于siRNA的临床使用至关重要。本项目拟利用HBV preS1多肽靶向结合肝细胞的特点，在preS1 21-47aa多肽C端添加9精氨酸多聚体，将preS1多肽改造为结合siRNA并靶向肝细胞的分子连接体，转运siRNA至肝细胞达到特异性抑制HBV复制与表达的效果。合成的preS1 21-47aa和9精氨酸多聚体崁合多肽（2147R）分别在持续复制HBV细胞模型和HepG2.2.215小鼠肿瘤模型上验证了其转运siRNA抑制HBV复制和表达的效果。实验获得获得了以下研究结果：1）合成相应分子连接体及siRNA，验证了两者的结合能力。2）分子连接体可靶向转运siRNA进入肝源性细胞。3）分子连接体-siRNA复合物可以抑制细胞内源性HBV X基因的表达。4）分子连接体-siRNA复合物可以抑制细胞模型中HBV的表达和复制。5）分子连接体-siRNA复合物可以抑制动物模型中HBV的表达和复制。.在本项目的资助下，已发表论文6篇。其中SCI论著1篇，CSCD核心论文5篇。尚有一篇SCI论文在审稿之中，预计2013年能够见刊。通过本项目的实施，培养硕士研究生4名，1名已经毕业，3名在读。本课题的实施，锻炼了课题组年轻的研究队伍，使研究人员具备更好的实验技能和科研思维，掌握研究领域的前沿动态，进一步明确研究方向，为将来的发展奠定了基础。.基因治疗是目前研究热点之一，研究过程中存在许多不确定因素，属于探索性研究。本课题遇到的困难包含两方面，其一是建立转基因小鼠人鼠崁合肝HBV感染模型，后改为HepG2.2.215小鼠肿瘤模型替代。其二是转运载体的靶向性不如预期理想。这些问题拟在将来的研究中予以探索和解决。