中华猕猴桃矮型基因的分离与克隆

采用表达序列标签(EST)数据库(GenBank/dbEST)的简单序列重复(SSR)标记技术，结合群体分离分析法(BSA)对中华猕猴桃矮型突变体'赣猕5号'（AH）与正常雄株'奉雄2号'（ZC）的杂种F2代分离群体的矮型性状进行鉴定与分析,筛选出与中华猕猴桃矮型基因（DW）紧密连锁的EST-SSR标记。应用同源序列法，通过设计相关特异引物，对矮化类型和正常类型进行基因组DNA-PCR扩增，回收矮型DNA特异片段，经转化感受态的大肠杆菌，对获得的克隆进行测序与分析，初选出候选矮型相关基因。应用双假测交原理，采用BSA法，以候选基因片段为探针分析其与矮型性状的关系。通过构建与筛选细菌人工染色体（BAC）文库，获得阳性克隆并经测序与对比分析，最终获得候选矮型基因的全长序列。可为分子标记辅助选择和遗传转化奠定理论基础，对于实现矮化砧木和矮化品种的种质改良具有重大意义。