非甾体抗炎药物干预对巨噬细胞(RAW264.7)的脂质组学分析及生物信息学评价

批准号:
21275036
项目类别:
面上项目
资助金额:
78.0 万元
负责人:
冯毅凡
依托单位:
学科分类:
B04.化学测量学
结题年份:
2016
批准年份:
2012
项目状态:
已结题
项目参与者:
郭晓玲、孟青、姜苗苗、芮雯、钟艳梅、赵丽丽、杨娥、张宇、宋剑鳌
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
微信扫码咨询
中文摘要
本研究以现代分析技术为核心技术,探讨细胞不同状态下的内源性脂质成分变化的内在相关性,结合化学计量学与生物信息学阐明其机制,并应用于药物筛选评价。.具体主要采用色谱-波谱联用分析技术,进行在线分析鉴别,应用化学计量学原理,筛选最佳算法处理实验数据;对RAW264.7细胞总脂质成分进行鉴别,并对不同状态(正常状态、炎症状态、给药状态)下该细胞脂质成分的变化进行量化描述,寻找与炎症反应有关的特征性脂质成分;采用生物信息学表征其生物学意义,预测潜在的与炎症反应相关的细胞内源性脂质成分靶点,并应用以上靶点对高良姜二苯基庚烷的抗炎活性作用进行评价,推测其可能的抗炎机理。.本研究首次应用色谱-波谱联用技术结合化学计量学方法及生物信息学方法对RAW264.7细胞不同状态下的脂质成分进行分析鉴别,提出一种基于色谱-波谱分析化学技术的细胞水平药物评价筛选方法,为系统药物研究提供理论支持。
英文摘要
In this study, as the core technology of modern analytical techniques to explore the correlation of the endogenous lipid components in the different states of the cell changes, combined with chemometrics and bioinformatics to elucidate its.This study was used mainly on-line analysis to identify the application of chemical metrology with chromatography - spectroscopy analytical techniques ,and screening the best algorithm to deal with the experimental data; the total lipid composition of the RAW264.7 cells were identified, and under different states (normal state. inflammatory status, delivery status) the changes in the the lipid component of the cell was quantitative described for seek out the characteristic lipid components; characterize their biological significance by Bioinformatics , and predict potential targets which is cells endogenous lipid components related to the inflammatory effect ,and use these targets on the role of anti-inflammatory activity of galangal diarylheptanoids evaluation suggesting its possible anti-inflammatory mechanism..This is the first application of chromatography - spectroscopy combined technology associated with chemometric methods and bioinformatics methods to analyze the lipid components the RAW264.7 cells under different states; and propose a method which is for drug evaluation screening by chromatography - spectroscopy Analytical Chemistry techniques at the cellular level.
本项目主要从以下几个方面开展研究,探讨非甾体抗炎药物干预RAW264.7细胞炎症模型的甘油磷脂代谢变化,以及高良姜二苯基庚烷A对炎症细胞甘油磷脂代谢的影响及其抗炎作用机制。.(1).本课题组在研究过程中,首先优化各种相关分析条件,建立了一套稳定可靠的UPLC/Q-TOF MS分析方法,并运用此法对RAW264.7细胞膜脂质成分进行鉴定。.(2).通过MTT实验确定非甾体抗炎药物及二苯基庚烷A的最佳给药浓度,确定炎症模型的造模条件并通过检测TNF-α的含量验证炎症模型是否成功。.(3).RAW264.7细胞脂质成分经过 UPLC/Q-TOF MS 分析之后,产生大量的数据,本课题组建立了准确可靠的的液质数据导出方法及预处理方法(MarkerLynx)。随后,通过SIMCA-P软件、R语言以及统计学方法对导出的原始数据进行分析,筛选出潜在甘油磷脂生物标记物。.(4).利用UPLC/Q-TOF MS分析方法以及化学计量学方法,将空白组、炎症组、非甾体抗炎药物(阿司匹林、布洛芬、吲哚美辛)给药组两两比较,筛选得到炎症组与空白组的病理标记物28个,29,23,22吲哚美辛与炎症组之间的药理标记物29个,阿司匹林与炎症组之间的药理标记物23个,布洛芬与炎症组之间的药理标记物22。并得到17个不同非甾体抗炎药物之间共有的潜在甘油磷脂生物标记物。.(5).利用UPLC/Q-TOF MS分析方法分析空白组、炎症组、给药组在不同时间点(0.5h,4h,12h,16h,24h)的甘油磷脂代谢变化,筛选各组在各个时间点的潜在甘油磷脂生物标记物,得到不同时间点的10个生物标记物。其中PC(17:1/18:1)和PA(18:0/18:4)贯穿于炎症刺激16h-24小时过程中,可以作为细胞炎症开始消退,细胞膜上钙离子亲和力下降的给药生物标记物。这为研究炎症过程中甘油磷脂的动态变化奠定基础.(6).应用已建立的分析方法对二苯基庚烷A干预RAW264.7细胞炎症模型的甘油磷脂代谢进行研究,寻找二苯基庚烷A在炎症过程中的脂质作用靶点。并通过生物学实验,检测二苯基庚烷A对NO、PGE2、TNF-α、IL-1β、iNOS、COX-2表达水平的影响以及其对RAW264.7细胞炎症模型NF-κB信号通路和MAPKs信号通路的影响,从而对其抗炎机制进行研究。结果显示二苯基庚烷A与炎症组之间的药理标记物共有23个
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.1007/s10337-014-2822-6
发表时间:2015-02
期刊:Chromatographia
影响因子:1.7
作者:Xia Wu;Lilii Zhao;Haibo Peng;Yuqi She;Y. Feng
通讯作者:Xia Wu;Lilii Zhao;Haibo Peng;Yuqi She;Y. Feng
DOI:10.1002/jssc.201401120
发表时间:2015-03
期刊:Journal of separation science
影响因子:3.1
作者:Juanjuan Pi;Xia Wu;Shitian Yang;Pingyan Zeng;Y. Feng
通讯作者:Juanjuan Pi;Xia Wu;Shitian Yang;Pingyan Zeng;Y. Feng
DOI:10.1016/j.cbi.2016.06.025
发表时间:2016-08
期刊:Chemico-biological interactions
影响因子:5.1
作者:Xia Wu;Jiancheng Zhu;Yu Zhang;Weimin Li;Xiang-Lu Rong;Y. Feng
通讯作者:Xia Wu;Jiancheng Zhu;Yu Zhang;Weimin Li;Xiang-Lu Rong;Y. Feng
DOI:10.1002/bmc.3216
发表时间:2014-12
期刊:Biomedical chromatography : BMC
影响因子:--
作者:Yuqi She;J. Song;E. Yang;Lilii Zhao;Yan-Mei Zhong;W. Rui;Y. Feng;Xia Wu
通讯作者:Yuqi She;J. Song;E. Yang;Lilii Zhao;Yan-Mei Zhong;W. Rui;Y. Feng;Xia Wu
DOI:--
发表时间:2016
期刊:分析测试学报
影响因子:--
作者:佘玉奇;张国改;吴 霞;冯毅凡
通讯作者:冯毅凡
国内基金
海外基金
