斑马鱼抗寒相关转录因子的基因转移及其作用机制研究

转录因子是机体和细胞对外界环境刺激产生适应性反应的关键调控因子，但其在鱼类低温适应中的功能和作用机制还不清楚。本项目在发现瞬时过表达Btf3、Cebpd和Gtf2b等转录因子可增强斑马鱼幼体抗寒能力的基础上，通过研制可诱导表达不同转录因子的转基因斑马鱼模型，进一步研究其在低温适应中的功能和作用机制。主要取得了以下研究结果：1）成功研制了转btf3和转gtf2b基因的转基因斑马鱼品系，其中转btf3基因斑马鱼品系已获得纯合体；2）发现过表达外源Btf3能显著增强斑马鱼的低温耐受能力；3）鉴定了受Btf3调控的下游基因；4）证明斑马鱼在幼体阶段即具备低温适应的能力，研究了低温刺激后斑马鱼幼体的基因表达，鉴定出大量低温诱导的基因及可变剪接和可变启动子使用等转录调控事件；5）克隆了fos等低温诱导表达基因的上游调控序列并构建了荧光素酶报告载体。该项目的研究结果明确了转录因子Btf3在鱼类低温适应中的功能及其调控的下游基因，揭示了斑马鱼幼体在低温刺激条件下基因转录水平的表达调控特征，为深入研究鱼类低温适应的分子机理奠定了基础。