基于脊椎动物比较解剖学技术的贵州小型猪十二经五输穴标准化定位及穴区形态数据库构建

In order to compete for the leading position of China in international standards for acupuncture and moxibustion, setting national acupoints location standards for commonly used experimental animals is urgently need. In this study, we investigate the acupoints from the point of view of species evolution, to observe whether the the tissue of acupoint area is consistent with the origin homologous organ and tissue.in animals and human. We will focus on morphological and functional changes of nerves, blood vessels and muscles in vertebrate evolution, to explore general rules of standardization of acupoints in experimental animals..We will use techniques of comparative anatomy of vertebrates, combined with the methods of Traditional Chinese Veterinary Medicine, surface anatomy, skin potential test, and the qualitative, location and quantitative detection of skin gap junction protein, to carry out acupoints standardization study of the Five-shu points in twelve meridians of Sus Scrofa domestica var.mino guizhounensis Yu. This study also aims to construct the anatomical database of acupoints, through observation of gross anatomy, microscopic morphology and molecular expression of acupoints, to solve the problem of poor positioning of experimental animals and poor experimental reliability, and to provide theoretical and technical support for the standardization of animal acupoints. .It is the first time that Standardized acupoints location of Sus Scrofa domestica var.mino guizhounensis Yu, which will play a leading role in the development of acupoints location of national standards for common used experimental animals.

为了争夺中国在针灸国际标准制定中的主导地位，常用实验动物腧穴定位国家标准的研制已迫在眉睫。本课题从物种进化角度进行腧穴的研究，观察动物与人穴区组织是否为来源一致的同源器官和组织，以脊椎动物进化发育中神经、血管、肌肉的形态与功能改变为观察重点，研究实验动物腧穴标准化定位的一般的规律。. 本课题采用脊椎动物比较解剖学方法和技术，结合中兽医学、表面解剖学、皮肤电位测定及皮肤缝隙连接蛋白分子定性、定位、定量检测等方法对贵州小型猪十二经上五输穴开展规范化和标准化定位，并对腧穴进行大体、显微形态和分子表达情况的研究，构建穴区的解剖学数据库，拟解决实验动物穴位定位不一，实验信度差的问题，为动物腧穴标准化定位提供理论与技术支撑。. 小型猪腧穴标准化定位工作，首次对实验动物腧穴进行定位标准化、规范化研究，必将对常用实验动物腧穴定位国家标准的制定起到引领作用。

为了争夺实验针灸学国际标准制定中的主导地位，急需对常用实验动物腧穴定位进行深入的研究。国内《实验针灸学》教材中采用的动物腧穴定位行业标准使用了近30年，卓有成效地推动了实验针灸的发展，但任有很多动物腧穴没有明确定位方法，有定位方法的腧穴所取位置并不都一致。动物实验是探索经络腧穴现代医学机理的关键，动物腧穴的相关问题导致其研究结果重复性差，数据缺乏可比性，严重影响了实验针灸科研成果的国际交流。.本课题以人体腧穴国家标准与国际标准为模板，采用比较解剖学方法和技术，对贵州小型猪十二经上五输穴进行定位。并采用皮肤电位测定、组织学切片与WB、RT-PCR方法检测小型猪五输穴。结果发现贵州小型猪大多数五输穴定位可以参照表面解剖学进行。但比较解剖学提示小型猪与人穴区组织仅有部分是来源一致的同源器官和组织。皮肤电位测定发现，小型猪皮肤较厚，电阻较大，单以此方法定位结果可信度较低。组织学结果发现HE染色穴区与对照组无显著差异，Masson染色及免疫组化染色对神经纤维 (PGP9.5)发现部分腧穴与对照组有显著差异，但两者染色差异结果并不完全相同。免疫组化、WB及RT-PCR对Cx43进行定位、定性与定量分析发现，三者在区分腧穴穴区与对照组有一定的一致性，但不是完全一致。Cx43与Masson染色、神经纤维染色结果也不完全相同。对小型猪五输穴进行大体、显微形态和分子表达情况的研究提示，参照人体腧穴国家标准与国际标准，可对动物腧穴定位进行规范化的表述，实验动物腧穴定位采用多种方式确定可提高实腧穴定位信度。但需要特别注意的是部分腧穴穴区与对照组的各种特异性差异并不代表所有腧穴与对照组均有此差异，有此差异的组织结构也并非都是腧穴，两者之间的关系需要进一步进行研究。小型猪十二经五输穴定位工作，可将对常用实验动物腧穴定位国家标准的制定起到推动作用。

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