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多肽HBSP保护猪移植肾的信号通路的动态网络研究
结题报告
批准号:
81270832
项目类别:
面上项目
资助金额:
70.0 万元
负责人:
戎瑞明
依托单位:
学科分类:
H0507.肾移植
结题年份:
2016
批准年份:
2012
项目状态:
已结题
项目参与者:
武多娇、杨橙、赵天、胡美玉、赵梓彤、薛寅佳、李龙、邱月
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中文摘要
HBSP(helix B surface peptide)是我们自主合成并已申请专利的肾脏保护性多肽,前期研究已证实其在肾脏缺血再灌注损伤中具有显著的抗凋亡和抗炎症的保护作用,但其对胞内信号通路的影响机制不明。目前我们已建立猪肾冷保存及自体移植模型,猪多样化的基因背景及与人接近的肾脏结构均使其作为研究HBSP肾脏保护机制模型具有独特优势。因此,本课题拟在猪自体肾移植模型中验证HBSP对移植肾的保护效应,并进一步应用蛋白组学技术探索HBSP在移植前后不同时间节点所引起的肾脏内蛋白表达谱变化,通过对差异蛋白的分析比对筛选出HBSP所作用的胞内信号通路,绘制HBSP动态胞内信号转导机制网络图。在此基础上,我们将在体内运用基因沉默技术siRNA对信号通路上关键接头蛋白的表达进行干预,验证信号通路,最终深入阐明HBSP对肾脏的保护作用机制,为HBSP的临床转化提供理论依据。
英文摘要
Helix B surface peptide (HBSP) is a novel renoprotective peptide,synthesized by our group and its patent received. Our preliminary studies have confirmed significant anti-apoptotic and anti-inflammatory effects of HBSP in renal ischemia reperfusion injury, but its intracellular signaling pathway still needs further research. We have established the kidney cold preservation and autotransplantation model in porcine. Porcine, as a research platform, displays unique advantages of diverse genetic background and its structural similarity to human kidney. Therefore, this project intends to evaluate the renoprotective effect of HBSP in the porcine autotransplantation model and to explore its mechanism. We will analyze HBSP-induced kidney protein expression changes on different timepoints with iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation) labeling and quantitative proteomic technology, and screen out potential intracellular signaling pathways of HBSP by identifying differentially expressed proteins. We will further use siRNA to interfere with the expression of key molecules in the newly discovered signaling pathways in vivo for verification. This project aims to clearify the renoprotective mechanism of HBSP, providing theoretical support for its clinical translation in kidney transplantation.
缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury, IRI)作为肾移植中不可避免的病理生理过程,可促进细胞的凋亡和炎症反应,加重移植肾的损伤。我们根据促红细胞生成素(EPO)3D结构的β螺旋表面中11个氨基酸的序列自主合成了小分子多肽 HBSP (helix B surface peptide) ,我们首先评估了HBSP在体内的肾脏保护作用并阐明了机制。发现HBSP能通过PI3K/Akt通路大幅降低肾脏缺血再灌注损伤所引起的肾小管上皮细胞凋亡和间质炎症。但HBSP半衰期短,极大地限制了其临床应用前景。为此,我们发明了硫醚环肽 CHBP (cyclic helix B peptide)。大幅提升了稳定性和生物学活性。在肾脏缺血再灌注损伤后的早期及恢复期,我们发现CHBP 能减轻急性损伤,并抑制远期纤维化。我们检测由 CHBP引起的不同时点细胞内蛋白表达谱的变化,筛选差异蛋白并进行了验证,揭示 了CHBP的重要信号通路,并最终绘制了动态网络图。为了充分模拟临床,我们采用猪的自体肾移植缺血再灌注损伤模型,研究基因治疗对供肾和移植肾的保护作用。我们发现裸露的Caspase-3 siRNA通过肾动脉直接给药并冷保存24h后对供肾具有显著的保护作用,但是对移植2天后的移植肾却没有保护作用,并且增加了炎症反应和细胞凋亡。我们研究发现,短效的Caspase-3 siRNA治疗引起了固有免疫中TLR3、TLR7和PKR的激活,导致机体系统性的反馈调节。为此,我们使用LNA技术修饰的血清稳定型的Caspase-3 siRNA,延长观察期至移植后2周,发现血清稳定型Caspase-3 siRNA显著保护了供肾及移植肾,具有巨大的临床转化价值。这些结果为今后防治缺血再灌注损伤的器官保护药物的设计和临床前研究提供了宝贵的实验数据。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
The regulatory T cell effector soluble fibrinogen-like protein 2 induces tubular epithelial cell apoptosis in renal transplantation
调节性T细胞效应可溶性纤维蛋白原样蛋白2诱导肾移植肾小管上皮细胞凋亡
DOI:10.1177/1535370213514921
发表时间:2014-02-01
期刊:EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE
影响因子:3.2
作者:Zhao, Zitong;Yang, Cheng;Zhu, Tongyu
通讯作者:Zhu, Tongyu
Innate immunity activation involved in unprotected porcine auto-transplant kidneys preserved by naked caspase-3 siRNA.
裸 caspase-3 siRNA 保存的无保护猪自体移植肾中涉及的先天免疫激活
DOI:10.1186/1479-5876-11-210
发表时间:2013-09-13
期刊:Journal of translational medicine
影响因子:7.4
作者:Yang C;Li L;Xue Y;Zhao Z;Zhao T;Jia Y;Rong R;Xu M;Nicholson ML;Zhu T;Yang B
通讯作者:Yang B
A novel cyclic helix B peptide inhibits dendritic cell maturation during amelioration of acute kidney graft rejection through Jak-2/STAT3/SOCS1.
一种新型环状螺旋 B 肽在通过 Jak-2/STAT3/SOCS1 改善急性肾移植排斥过程中抑制树突状细胞成熟。
DOI:10.1038/cddis.2015.338
发表时间:2015-11-26
期刊:Cell death & disease
影响因子:9
作者:Yang C;Zhang Y;Wang J;Li L;Wang L;Hu M;Xu M;Long Y;Rong R;Zhu T
通讯作者:Zhu T
Skewed T-helper (Th)1/2- and Th17/T regulatory‑cell balances in patients with renal cell carcinoma.
肾细胞癌患者中偏斜的T-helper(Th)1/2和Th17/T调节细胞平衡。
DOI:10.3892/mmr.2014.2778
发表时间:2015-02
期刊:Molecular medicine reports
影响因子:3.4
作者:Li L;Yang C;Zhao Z;Xu B;Zheng M;Zhang C;Min Z;Guo J;Rong R
通讯作者:Rong R
Increased peripheral and local soluble FGL2 in the recovery of renal ischemia reperfusion injury in a porcine kidney auto-transplantation model.
猪肾自体移植模型肾缺血再灌注损伤恢复过程中外周和局部可溶性 FGL2 的增加
DOI:10.1186/1479-5876-12-53
发表时间:2014-02-23
期刊:Journal of translational medicine
影响因子:7.4
作者:Zhao Z;Yang C;Li L;Zhao T;Wang L;Rong R;Yang B;Xu M;Zhu T
通讯作者:Zhu T
M-MDSC来源的IL-15调控MSC糖代谢重编程在肾纤维化中的作用与机制研究
  • 批准号:
    82270789
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    52万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    戎瑞明
  • 依托单位:
脂代谢malonyl-CoA/ACSF3轴介导的线粒体自噬调控MDSCs前体分化在急性肾损伤中的机制研究
  • 批准号:
    81970646
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    戎瑞明
  • 依托单位:
CHBP诱导的MDSC极化在器官移植免疫耐受中的作用及机制
  • 批准号:
    81770747
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2017
  • 负责人:
    戎瑞明
  • 依托单位:
国内基金
海外基金