基于钙稳态失调探讨不同电针头穴透刺对帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经元凋亡及相关蛋白基因表达影响的研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81173336
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    58.0万
  • 负责人：
    王顺
  • 依托单位：
    黑龙江省中医药科学院
  • 学科分类：
    H3118.中医针灸学
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

帕金森病(PD)是一种以黑质纹状体通路的退变为主要特征的神经系统变性疾病。该病病情呈进行性加重，严重限制病人的活动能力及影响病人的生活质量。到目前为止左旋多巴替代疗法一直被誉为PD药物治疗的"金标准"。但新近的实验结果表明，该类药物可促进黑质DA能神经元程序化死亡。课题组采用头穴透刺治疗本病取得了很好的临床效果，现为进一步提高疗效，并探讨其理论机制，本课题通过测定帕金森模型大鼠造模及不同干预手段治疗前后黑质钙离子分布、贮存和转运过程等不同环节的变化情况，以及神经元和相关蛋白基因调控层面的变化情况，从维持DA神经元钙稳态以降低凋亡诱发因素；从基因调控水平上协调bcl-2与bax的表达以及在效应阶段阻止Caspase-3的激活与释放这三个不同角度探讨针刺对DA神经元凋亡的干预途径及其抗凋亡的作用机制。同时根据不同电针的作用效果优选出最佳干预手段，为帕金森病的临床治疗开辟新的途径。

结项摘要

目 的：以美多芭为对照干预，观察不同电针（音乐电针、脉冲电针）百会、太阳穴对PD模型大鼠造模前后维持细胞钙稳态的不同环节的影响；从相关蛋白及其基因表达方面观察其对DA神经元凋亡的影响；并对DA能神经元的形态、数量做了形态学上的进一步验证，从而探讨不同干预手段是否对其发挥调节作用，及其发挥作用的途径、靶点、物质基础以及优效性。方 法：采用单侧纹状体双靶点注射6-OHDA建立PD大鼠模型，通过阿扑吗啡（APO）诱发的行为学检测验证模型的成功率。采用分光光度法测定大鼠脑内黑质Ca2+浓度、Ca2+-ATPase活性、Na+-K+-ATPase活性、Ca2+-Mg2+-ATPase活性；免疫组化染色法检测钙结合蛋白D28k的表达；以原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡水平；免疫组织化学法检测黑质Caspase-3表达；原位杂交法检测黑质bcl-2mRNA、baxmRNA表达；HE染色、免疫组织化学法染色观察黑质多巴胺能神经元及TH免疫组化染色阳性细胞；应用高效液相色谱-电化学法测定各组大鼠纹状体内多巴胺含量。采用美多芭灌胃为对照干预方法，应用音乐电针及脉冲电针为治疗干预方法。结 果：1、不同电针尤其是音乐电针干预，可显著提高PD大鼠黑质三种ATPase活性,降低Ca2+的浓度以及Calbindin-D28k的阳性表达,从而改善PD大鼠脑组织中钙稳态的状态。2、不同电针尤其是音乐电针干预，不仅能够减轻黑质多巴胺能神经元的凋亡指数情况，而且可以减轻Caspase-3的阳性表达，可上调凋亡抑制因子Bcl-2mRNA的表达以及下调凋亡促进因子BaxmRNA的表达，促进二者之间关系恢复平衡。3、不同电针干预可使HE染色及电镜观察下黑质神经细胞数目增多、形态结构趋于正常；可增加黑质区TH免疫反应阳性细胞的数量、使细胞结构和形态接近正常，TH阳性表达面密度、数密度及积分光密度均升高，可使纹状体多巴胺含量有所增加。4、美多芭干预对PD模型大鼠脑内钙稳态状态及神经元凋亡相关指标均无明显影响，仅能增加脑内纹状体的多巴胺含量。结 论：1、不同电针能够实现在PD过程中抗DA能神经元凋亡的作用效果，可使DA能神经元形态改善、数量增多以及TH阳性细胞的表达增多。2、不同电针干预从维持DA神经元钙稳态；从基因调控水平上协调bcl-2与bax的表达以及在效应阶段阻止Caspase-3的激活与释

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（1）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
不同电针百会、太阳穴对帕金森模型大鼠多巴胺能神经元保护作用的研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中国中医药科技
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王顺
  • 通讯作者：
    王顺
电针百会、太阳穴对帕金森模型大鼠黑质Caspase-3表达及细胞凋亡的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中国中医药科技
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王顺
  • 通讯作者：
    王顺

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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