研究背景:11q23 染色体异常是急性白血病中常见的遗传学改变，此异常导致位于11q23 的MLL基因异常表达，研究显示在 HOXC8 基因启动子区有其它具有 H3K4-me3 甲基化修饰作用的重要调控蛋白，推测 Ash2L 可能参与HOXC8 基因启动子区域高水平的H3K4-me3 和 HOXC8 基因激活。研究内容:1.选择常见两种 MLL基因重排类型MLL-AF4 和 MLL-AF9，对应细胞系为 RS4;11 和 THP-1，研究 H3K4-me3 甲基化修饰在 HOXC8 基因启动子区水平及 HOXC8 基因表达水平。2.干扰RS4:11和THP-1细胞系的ASH2L基因后，分析HOXC8启动子特异性的位点以及RBBP5,WDR5, MLL基因和BPTF的表达，分别沉默野生型 MLL、 WDR5、 RbBP5 和 BPTF 基因，研究HOXC8 基因启动子区 H3K4-me3 和 HOXC8 基因表达水平变化。3.沉默 Ash2L 和有变化的调控蛋白，研究是否因此影响另一方在HOXC8 基因启动子区域的结合。结果和关键数据：1.HOXC8基因较高水平表达在两种MLL重排细胞系中。2.ASH2L基因敲除后，HOXC8基因和蛋白水平随之下调，HOXC8 启动子区和转录起始区域的H3k4me3的修饰有明显的减少。干扰ASH2L后，BPTF和RbBP5在RS4:11细胞HOXC8的启动子区都有减弱；WDR5和MLL在HOXC8的两个位点都有减弱；在THP-1细胞中，扰ASH2L后，BPTF和RBBP5在HOXC8的启动子区结合有减弱。3.除了ASH2L, WDR5, RBBP5, MLL1 and BPTF 蛋白对HOXC8基因的表达也有影响。RS4:11细胞在沉默ASH2L后WDR5和RBBP5蛋白水平都分别出现明显下调，虽然MLL蛋白水平也有下调趋势。科学意义1.ASH2L依靠与MLL甲基化酶复合物中MLL、WDR5和RBBP5三个基因以及BPTF蛋白的相互作用通过组蛋白甲基化修饰以及重塑染色质结构，从而激活HOXC8基因。BPTF可使相关转录因子更易进入并结合在启动子区域，从而导致HOXC8基因转录活化。MLL融合蛋白丧失了甲基转移酶的功能和活性，无法调控靶基因HOXC8的转录活性。 WDR5和RBBP5蛋白与ASH2L在调控组蛋白甲基化作用时存在作用关系。