基于生物表面活性剂的逆胶束体系构建及其对木质纤维素降解酶的纯化方法与机理

本项目研究了基于生物表面活性剂的逆胶束体系构建及其对木质纤维素降解酶的纯化方法与机理。本项目研究了可应用于构建逆胶束的生物表面活性剂的特征特性，选定了鼠李糖脂作为表面活性剂构建逆胶束体系，并将其应用于木质纤维素降解酶的纯化。本项目进行了典型木质纤维素降解酶类的生产及初步提取，并对制取的粗酶液活性及稳定性进行了分析；结合逆胶束纯化酶的技术原理，通过考察生物表面活性剂鼠李糖脂在逆胶束体系中的聚集行为，探讨了鼠李糖脂的属性与逆胶束的特征关联，研究了典型木质纤维素降解酶类在逆胶束体系中的传输和界面效应，分析了其在生物表面活性逆胶束体系中活性及稳定性，分析了生物表面活性剂逆胶束对纯化目标酶的结构及活性影响，并对酶在逆胶束中的分配动力学行为进行模型表征，确定了相关的模型参数，从而阐明了基于生物表面活性剂的逆胶束体系构建及其对木质纤维素降解酶的纯化方法与机理。本项目具体考察了纤维素酶在鼠李糖脂逆胶束体系中的聚集行为及活性影响，证实了鼠李糖脂逆胶束体系相对于其他体系的优越性，优化了逆胶束体系条件；本项目通过前萃后萃两个过程萃取纯化木素过氧化物酶和漆酶，考察了一系列因素对萃取纯化效果的影响，并确定了最佳的萃取纯化条件，纯化效果通过聚丙烯酰胺凝胶电泳得到了进一步的证实。萃取纯化后项目阐明基于生物表面活性剂的逆胶束体系构建及其对木质纤维素降解酶的纯化方法与机理。研究结论为生物表面活性剂在蛋白酶纯化提供了具有理论与实践意义的参考。同时也为生物表面活性剂在某些行业的应用以及环境友好型物质的利用开创了新的篇章。