拟南芥隐花素调节的核蛋白组学及分子遗传学研究

采用蛋白组学方法比较分析不同蓝光条件下，野生型拟南芥和cry1cry2突变体的核蛋白组，筛选和鉴定受隐花素调节的核（CRY-regulated nuclear，CRN）蛋白，随后采用遗传学手段，克隆包括课题组已鉴定的14-3-3在内的CRN类蛋白基因，构建各种过表达和干扰载体，通过转化拟南芥野生型、cry1突变体、cry2突变体、cry1cry2突变体以及SES2抗基因沉默突变体，获取各种功能获得型和功能丧失型突变体，并在不同光照条件下观察转基因植物幼苗的表型和长日/短日条件下植物的开花时间，明确不同CRN类蛋白基因在蓝光信号传导中的具体功能。在此研究基础上，采用酵母双杂交，筛选与CRN类蛋白互作的蛋白因子，同时制备CRN类蛋白抗体，采用免疫共沉淀和Western杂交进一步分析鉴定CRN类蛋白，以及分析CRN类蛋白受蓝光和隐花素调控的程度，以明确CRN类蛋白参与蓝光信号传导的分子机制。