t(16;21)(p11;q22)/FUS-ERG融合基因相关急性白血病的生物学特征及发病机制研究

t(16;21)(p11;q22)是急性白血病（AL）中一种较常见的再现性染色体异常，目前对t(16;21)(p11;q22)/FUS-ERG相关白血病尚缺乏系统深入的研究，本课题组对该类白血病进行了以下研究：.（1）.t(16;21)(p11;q22)/FUS-ERG相关白血病的临床和实验室特征：应用多种遗传学技术，筛选出国际上最大一组伴有t(16;21)/FUS-ERG的病例31例，并发现该类患者有独特的临床和实验室特征：t(16;21)(p11;q22)主要见于AML，偶见于CML急变和B-ALL。 t(16;21)(p11;q22) 多发生于年轻患者，可见于M3以外的各个亚型，骨髓涂片常可见吞噬红细胞现象，免疫表型通常以髓系和单核系抗原表达为主，预后恶劣。.（2）.JIH-4细胞系的建立和鉴定：成功建立了1株伴有t(16;21)/FUS-ERG融合基因的新白血病细胞系JIH-4，并进行了严格的生物学背景鉴定。JIH-4细胞呈单细胞样悬浮生长，圆形，2～3天换液，细胞形态学呈单核系特征，非特异性酯酶染色阳性，可被氟化钠抑制，免疫表型为髓系表达，经液氮或-80℃低温冰箱冻存、复苏后仍能持续增殖，倍增时间约84小时。目前JIH-4已被国际公共细胞库收录；.（3）.FUS-ERG融合基因的克隆、表达载体的构建和转染：项目组克隆到了FUS-ERG的全长cDNA，并应用Not1 及Nsi1酶切位点将其与慢病毒载体LV5连接，经质粒大抽获得高纯度高质量质粒，经条件优化，采用磷酸钙转染法将FUS-ERG-LV5质粒及其空载体质粒分别转入K562及32D细胞系，并成功构建携带目的基因的稳转细胞株。.（4）.t(16;21)(p11;q22)/FUS-ERG相关白血病的外显子组测序：对6例患者白血病细胞进行了靶向外显子捕获+测序，共发现33个基因突变，累及32个基因，其中RUNX1基因突变可能是FUS-ERG融合蛋白的重要协同遗传学异常。这些研究结果为进一步阐述FUS-ERG白血病的发病机制提供了重要线索。.（5）.项目组发表SCI论文7篇，主编专著1部。