微生物合成的脂肽类生物表面活性剂具有低毒、高效、易降解等优势，但其培养基中的碳源成本过高限制了脂肽工业化的生产和应用，利用废弃食用油脂生物合成脂肽可以解决这一问题。本研究以9种食用油脂为碳源生物合成脂肽，采用色谱、质谱和二维核磁技术鉴定产物为Surfactin，采用疏水性的食用油脂为碳源时合成的Surfactin产量普遍高于葡萄糖。大豆油合成的Surfactin的产量达到495 mg/L，较葡萄糖培养提高了约20倍。以食用油脂的主要成分三油酸甘油酯为碳源合成的Surfactin的产量达到257 mg/L，远高于葡萄糖。酸析冻干后得到的粗产物其CMC为0.28 g/L，可使培养液的表面张力降至33.0 mN/m。在此基础上研究氨基酸对B.subtilis ATCC 6633合成脂肽的影响，结果发现在亮氨酸(0.1 g/L)、谷氨酰胺(1 g/L)、精氨酸(1 g/L)和谷氨酸(1 g/L)的干预下，Surfactin产量均有所提高，产物的表面活性发生改变。采用液质联用技术分析氨基酸干预前后Surfactin同系物组成的变化，结果表明0.1 g/L 亮氨酸干预下，Surfactin的C14同系物的含量略有降低；1 g/L 精氨酸干预下，C13同系物的含量有所增加，C15同系物的含量相应减少。采用稳定同位素技术研究微生物对脂肪酸酯和氨基酸的利用途径，结果表明微生物优先利用三油酸甘油酯水解后生成的甘油，使其对油酸的代谢能力明显提高，菌体内约30%的氮素来源于氨基酸，表明谷氨酸干预下对微生物碳、氮源利用途径产生显著影响。异柠檬酸脱氢酶作为TCA循环的限速酶，是微生物合成脂肽过程中的关键酶，研究发现其酶活与Surfactin产量呈负相关。通过多因素偏最小二乘法模型来表征脂肽结构差异与其效能的关系，结果表明脂肽同系物中C13和C15的百分含量与CMC、排油圈具有明显的相关性。以上研究结果表明，采用氨基酸干预脂肪酸酯生物合成特定性能的脂肽是可行的，对废弃食用油脂资源化合成高性能脂肽提供了理论支持。