红茶改善秀丽线虫氧化应激能力的分子机理研究
批准号:
31270733
项目类别:
面上项目
资助金额:
78.0 万元
负责人:
龚雨顺
依托单位:
学科分类:
经济林学
结题年份:
2016
批准年份:
2012
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘仲华、林勇、李娟、黄浩、彭雨轩、张健炜、高燕
中文摘要
氧化应激是细胞功能失常或特异分子信号转导引起机体的一系列生理、病理及适应性反应,它与许多慢性疾病密切相关。目前,抗氧化性能的研究已从清除体内自由基能力演变为从整体上评价其改善机体内源性抗氧化系统效能。申请者前期研究表明,红茶能显著延长胡桃醌诱导产生氧化应激条件下模式生物秀丽线虫的平均寿命。本项目拟在此基础上,以秀丽线虫为活体模型,进一步探讨不同环境应激条件下红茶对秀丽线虫寿命的影响;利用现代分离纯化技术与活性评价跟踪相结合的方法获得红茶改善氧化应激能力的功能因子;采用cDNA表达谱芯片和差异蛋白质组学技术深入研究红茶功能因子改善氧化应激作用网络通路;通过免疫印迹、实时荧光定量PCR和基因突变等技术对相关功能基因从细胞与分子水平进行验证,以探明红茶改善氧化应激能力的分子机理。本研究有助于进一步探明红茶对由氧化应激引起的相关慢性疾病的预防作用及机制,为红茶的健康消费与高效利用提供科学依据。
英文摘要
Oxidative stress triggers a range of physiological, pathological, and adaptive responses in cells either as a result of cellular damage or through specific signaling molecules.Antioxidant activity had been determined by the ability of compounds to scavenge free radicals of organisms in previous studies. Recent findings support that endogenous expression and regulation of antioxidant genes serve as a direct role in protection against oxidative stress. Owing to actually increasing the risk of chronic deseases, it is of important practical value to study oxidative stress. Our previous research showed that black tea significantly increased the mean lifespan of C. elegans under juglone-induced oxidative stress. On the basis of this work, The molecular mechanism of black tea protective responsing to oxidative stress in C. elegans will be achieved in this research as follows: Effect of black tea on the mean lifespan of C.elegans under different environmental stresses will be developed further. The functional compounds of black tea responsing to oxidative stress will be obtained by combining modern isolation and purification technologies with activity evaluation. The signal pathway networks will be systematically investigated by using the methods of cDNA expression profile chip and difference proteomics. The functional genes will be comfirmed at the cellular and molecular level by western-blotting,realtime quantitative PCR and genetic mutation. The work will give a beneficial support for studying the protective effect of black tea against chronic diseases associated with oxidative stress. It also will provide scientific basis for reasonable developing the health protection of black tea.
红茶属于发酵茶。与绿茶通过杀青、揉捻与干燥而成的加工工艺不同,红茶经过萎凋、揉捻、发酵与干燥加工而成。其加工过程中茶鲜叶经历了一个由轻而重的外源压力应激过程。由于动植物应对外源环境胁迫具有一定保守性,我们推测红茶具有特殊的抗外源压力应激的生物活性。.以相同的茶鲜叶为原料,制备同规格的红茶与绿茶。利用模式生物秀丽线虫为研究对象,对比研究了二者抗外源压力应激作用。研究发现,红茶抗紫外线诱导氧化应激能力与绿茶效果相当。红茶能够显著增加渗透压力应激条件下秀丽线虫存活率、改善其运动能力与因渗透失水而导致的虫体缩小,抗渗透应激能力优于绿茶。.红茶能明显改善由紫外线、热应激与胡桃醌等3种外源氧化应激作用秀丽线虫存活率。红茶可以至少通过2条不同的信号途径来提高抗外源应激能力:(a)作用sir-2.1基因激活daf-16/sod-3调节内源抗氧化体系来保护外源压力应激;(b)作用WNK/GCK途径提高秀丽线虫抗渗透应激能力。.设计了一种成本低廉、绿色安全与环境友好的EGCG制备方法,和一种低儿茶素与咖啡因含量、高茶黄素含量的茶黄素样品分离纯化方法。对相关成分进行结构鉴定,并对其相关生物活性进行了研究。.通过添加2种抗氧化剂,过氧化物酶(CAT,可以清除细胞体外的外源活性氧)与N-乙酰半胱氨酸(NAC,可以同时清除细胞体外与细胞体内活性氧),从氧化应激的角度研究了EGCG对大肠杆菌的抑菌作用。EGCG在大肠杆菌培养液LB中能够自动氧化产生活性氧,生成量与培养液中蛋白胨密切相关。自动氧化生成的活性氧并不是EGCG抑菌的主要因素。.通过添加外源促氧化剂百草枯与采取无氧培养等方式,观测大肠杆菌菌液O.D.600nm值、菌落数和菌斑形态、DCFH-DA荧光探针检测活性氧,测定内源基因表达、酶活力变化。研究发现,EGCG诱导大肠杆菌体内活性氧生成是其抑制大肠杆菌生长的主要原因。.与呈剂量依赖方式抑菌作用不同,EGCG对秀丽线虫的抗衰老作用具有多样性,低浓度具有延长秀丽线虫寿命作用,高浓度可以缩短秀丽线虫寿命作用,符合Hormesis效应。同样,EGCG能够短暂秀丽线虫体内诱导内源活性氧水平的升高。.由于不同生物应激响应通路具有同源性,本研究结果为进一步研究红茶具有预防多种疾病发生提供一定的理论基础,为合理消费茶叶提供重要前期科学支撑。
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Tea polyphenol epigallocatechin gallate inhibits Escherichia coli by increasing endogenous oxidative stress
茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯通过增加内源性氧化应激抑制大肠杆菌
DOI:
10.1016/j.foodchem.2016.08.098
发表时间:
2017-02-15
期刊:
FOOD CHEMISTRY
影响因子:
8.8
作者:
[Xiong, Li-Gui, Chen, Yi-Jun, Liu, Zhong-Hua]
通讯作者:
Liu, Zhong-Hua
DOI:
10.1021/jf503120j
发表时间:
2014-11
期刊:
Journal of agricultural and food chemistry
影响因子:
6.1
作者:
[Ligui Xiong;Jian-an Huang;Juan Li;Peng Yu;Zherui Xiong;Jian-wei Zhang;Yushun Gong;Zhong-Hua Liu-Zhong]
通讯作者:
Ligui Xiong;Jian-an Huang;Juan Li;Peng Yu;Zherui Xiong;Jian-wei Zhang;Yushun Gong;Zhong-Hua Liu-Zhong
Water extract of the fungi from Fuzhuan brick tea improves the beneficial function on inhibiting fat deposition
茯砖茶真菌水提取物提高抑制脂肪沉积的有益功能
DOI:
10.3109/09637486.2014.898253
发表时间:
2014-08-01
期刊:
INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD SCIENCES AND NUTRITION
影响因子:
3.9
作者:
[Peng, Yuxuan, Xiong, Zhe, Liu, Zhonghua]
通讯作者:
Liu, Zhonghua
DOI:
--
发表时间:
2015
期刊:
茶叶科学
影响因子:
--
作者:
[谭斌, 龚雨顺, 黄建安, 刘仲华]
通讯作者:
刘仲华
DOI:
--
发表时间:
2015
期刊:
茶叶科学
影响因子:
--
作者:
[熊立瑰, 黄建安, 龚雨顺, 刘仲华]
通讯作者:
刘仲华
共 6 条
茶氨酸抑制高剂量EGCG诱发生物毒性的作用机制研究
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批准号:32472267
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项目类别:面上项目
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资助金额:50.00万元
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批准年份:2024
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负责人:龚雨顺
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依托单位:
茶叶EGCG调节机体内源活性氧的时空变化规律及作用机制研究
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批准号:32072155
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项目类别:面上项目
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资助金额:58.0万元
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批准年份:2020
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负责人:龚雨顺
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依托单位:
EGCG 延缓机体健康衰老作用与机制研究
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批准号:2018JJ2161
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项目类别:省市级项目
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资助金额:0.0万元
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批准年份:2018
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负责人:龚雨顺
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依托单位:
国内基金
海外基金