本研究项目开展自噬对白血病细胞化疗耐药的调控机制研究，明确FIP200（focal adhesion kinase family interacting protein of 200kD）介导自噬在白血病细胞化疗耐药过程的作用及分子机制。（1）我们成功构建慢病毒载体 FIP200 shRNA，证实该FIP200 shRNA 能有效沉默FIP200基因表达。将REH白血病细胞置于培养基中，体外应用Hoechst荧光标记，流式细胞仪检测，结果发现与空白载体相比，FIP200 基因沉默能促进白血病细胞凋亡的发生。应用Western blot方法检测白血病细胞 LC3-I、LC3-II、Benclin 1等，应用电镜观察以评价细胞自噬的形成，结果发现FIP200基因沉默可抑制白血病自噬的发生。（2）体外应用不同浓度的化疗药物处理白血病细胞，收集细胞进行耐药性及自噬水平检测、自噬分子信号通路检测等，结果发现FIP200基因沉默组细胞凋亡率明显高于空白对照组。将REH白血病细胞经尾静脉注射到SCID小鼠体内，成功建立REH细胞－SCID小鼠模型。将化疗药物经腹腔注射到白血病动物模型，结果发现联合化疗药物与FIP200基因沉默的小鼠生存时间明显延长，提示联合FIP200基因沉默能增强白血病细胞对化疗药物的敏感性。（3）应用免疫共沉淀技术检测ULK1-Atg13-FIP200 复合物、Beclin1-HMGB1复合物形成情况，进行细胞活性及耐药性检测，结果发现ULK1-Atg13-FIP200 复合物位于Beclin1-HMGB1复合物的上游。予特异性抗体抑制ERK和JNK磷酸化通路，通过Western blot检测Bcl-2、ERK、JNK磷酸化水平，免疫共沉淀法检测Beclin1-HMGB1复合物形成情况，结果发现FIP200通过ERK、JNK途径使Bcl-2磷酸化，介导Beclin1-HMGB1复合物形成。予丙酮酸乙酯抑制HMGB1转位，核浆分离法分别提取核蛋白和胞浆蛋白，通过Western blot及免疫荧光检测HMGB1转位水平，结果发现FIP200通过使HMGB1从胞核转位至胞浆，介导Beclin1-HMGB1复合物形成，从而影响下游自噬介导的白血病细胞化疗耐药。