microRNAs参与心肌纤维化发生及其机制研究

心肌纤维化是心肌重构的重要环节，普遍存在于心肌梗死、心肌肥厚、心律失常等心脏疾病中。在本项目资助下我们围绕microRNAs与心脏重构发生关系及药物干预措施，通过建立多种心血管疾病动物模型，采用电生理全细胞膜片钳、分子生物学、生物信息学等技术进行研究，阐明 microRNAs 在心肌纤维化中的作用及机制，为防治心肌纤维化提供新靶点。我们采用miR-328 的转基因实验动物，结合细胞水平，证实 miR-328 的高表达与胶原沉积的关系，并确定TGFβRIII 为 miR-328 的靶基因，证实miR-328 通过调控TGF-β 信号转导通路在心肌纤维化中发挥重要作用。同时我们发现miR-328可以促进心肌肥厚的发生，直接抑制靶蛋白SERCA2a表达，影响细胞内钙，激活Calcineurin/NFATc3信号通路，下调miR-328的表达则可有效的抑制心肌肥厚，本研究为miR-328参与心肌重构奠定了重要的理论基础。其次雌激素缺乏一直被认为能够增加心血管疾病的患病几率。我们应用冠状动脉结扎和切除卵巢手术，成功建立了心肌缺血（MI）、雌激素剥夺(OVX)的大鼠动物模型。结果显示心肌缺血伴随雌激素剥夺的模型组心律失常的发生几率显著增加，并伴随miR-151-5p的表达下调；miR-151-5p通过直接靶点PLM影响细胞内钙变化。此研究使miR-151-5p有望成为防治雌激素缺乏的缺血性心律失常的重要靶点。此外我们之前的研究证实尼古丁可以诱发心肌纤维化。在本项目中我们对心肌细胞给予不同浓度的尼古丁处理，发现其对心肌细胞的抑制成剂量、浓度依赖性。进一步研究揭示尼古丁可通过抑制MAPK/ERK-SRF，进而抑制miR-133表达，最终促进凋亡蛋白caspase-9高表达，诱发心肌细胞凋亡。此发现可能为研发预防尼古丁的心脏损伤的药物提供理论基础。我们进一步研究了中药丹参酮IIA在心肌细胞缺氧损伤中的保护作用，明确了丹参酮IIA通过激活MAPK/ERK信号通路，从而上调转录因子血清反应因子（SRF），进一步增加microRNA-133的表达，该研究为中药的研制开辟了新的思路。