家蚕合成分泌优异家蚕/蜘蛛复合丝纤维的研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    31702183
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C1709.养蚕学
  • 结题年份:
    2020
  • 批准年份:
    2017
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2018-01-01 至2020-12-31

项目摘要

Spider dragline (major ampullate) silk possesses extraordinary mechanical properties, and has broad application prospect. However, due to their cannibalistic behavior, it is impossible to obtain spider silk fibers on a large scale by farming spiders. In the present work, the piggyBac transposon-derived vectors containing 32-fold typical repetitive units of MaSp1 or 48-fold typical repetitive units of MaSp2 will be constructed, and transgenic silkworm strains harboring these corresponding piggyBac vectors will be generated using silkworm transgenic technology to specifically express the recombinant (re)-MaSp1 or recombinant (re)-MaSp2. Moreover, the endogenous silk gene, fibroin heavy chain (Fib-H), of the silkworm transgenic lineages obtained in our study will be mutated employing the CRISPR/Cas9 genome editing technology to reduce the silk protein expression levels, and the exogenous recombinant spider silk proteins expression levels would be enhanced. The work will provide guidance on how to further design and optimize the structure of re-spider proteins, will obtain more outstanding composite spider/silkworm silk fibers because of harboring larger molecular weight re-spider proteins with high expression levels, and will be enabled for the potentially broad applications of the silkworm silk fiber.
蜘蛛牵引丝(Dragline silk)拥有优越的性能,具有广泛的应用前景。但由于蜘蛛具有同类相食的行为,不能通过人工饲养获得大量的蜘蛛丝纤维,限制了蜘蛛纤维的应用。本项目拟通过构建包含类似于天然黑寡妇蜘蛛牵引丝基因MaSp1大小的32倍的重复序列单元和MaSp2的48倍重复序列单元质粒,采用转基因技术获得家蚕品种。同时,利用CRISPR/Cas9技术突变家蚕品种内源丝素重链基因,降低内源丝素重链的表达量,提高外源蜘蛛丝蛋白的表达水平。通过本项目的研究,能够大量获得牵引丝蛋白分子量接近天然蜘蛛、蛋白含量更高、机械性能更加优异的复合蜘蛛/家蚕丝纤维,乃至获得性能接近蜘蛛牵引丝的复合新型材料。

结项摘要

蜘蛛丝是一种高分子蛋白纤维,具有其他纤维不可比拟的优良特性。本课题.根据黑寡妇蜘蛛(Black Widow Spider, Latrodectus hesperus)牵引丝蛋白设计、合成并成功构建了包含不同重复单元的类MaSp1和MaSp2的系列载体,利用显微注射的方法,将其整合到家蚕的基因组内,经Q-PCR、Western blotting、杂交等方法的检测,证明已成功获得了多个转蜘蛛丝基因家蚕品系。进一步的分析表明:随着外源重组蛋白分子量的增加,复合丝纤维的机械性能逐渐增强。为进一步改良蚕丝质量奠定了坚实的基础。 .综合上述结果,本研究为探索采用家蚕生物反应器高效表达外源重组蜘蛛丝蛋白提高茧丝纤维的性能奠定了理论基础。同时为后续进一步研究高性能的丝纤维提供了重要的线索。项目资助发表SCI论文3篇,协助培养硕士研究生1名,1名在读。项目投入经费22万,支出17.6491万元。各项支出基本与预算相符合。剩余经费4.3509万元,剩余经费计划用于本项目研究后续支出。

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
The stability and antiapoptotic activity of Bm30K-3 can be improved by lysine acetylation in the silkworm, Bombyx mori
赖氨酸乙酰化可提高家蚕 Bm30K-3 的稳定性和抗凋亡活性
  • DOI:
    10.1002/arch.21649
  • 发表时间:
    2019-11-27
  • 期刊:
    ARCHIVES OF INSECT BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY
  • 影响因子:
    2.2
  • 作者:
    Ma, Yafei;Wu, Chengcheng;Nie, Zuoming
  • 通讯作者:
    Nie, Zuoming
Comparative mRNA and LncRNA Analysis of the Molecular Mechanisms Associated With Low Silk Production in Bombyx mori.
家蚕丝产量低下相关分子机制的 mRNA 和 LncRNA 比较分析
  • DOI:
    10.3389/fgene.2020.592128
  • 发表时间:
    2020
  • 期刊:
    Frontiers in genetics
  • 影响因子:
    3.7
  • 作者:
    Ruan J;Wu M;Ye X;Zhao S;Liang J;Ye L;You Z;Zhong B
  • 通讯作者:
    Zhong B
The complete chloroplast genome sequences of Hippuris vulgaris (Plantaginaceae).
Hippuris vulgaris(车前草科)完整叶绿体基因组序列
  • DOI:
    10.1080/23802359.2020.1846002
  • 发表时间:
    2021-01-11
  • 期刊:
    Mitochondrial DNA. Part B, Resources
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    You ZY;Ren LJ;Li YD;Ying JN;Zhang Y;Yu YJ;Xu XW;Wang RH;Qi ZC;Lu QX
  • 通讯作者:
    Lu QX

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其他文献

家蚕Bms3a基因真核表达载体的构建及其在家蚕细胞和蚕体中的表达
  • DOI:
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  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    激光生物学报
  • 影响因子:
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  • 作者:
    尤征英;周武松;徐家萍;杨莹;凌琳;王文兵
  • 通讯作者:
    王文兵
家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析
  • DOI:
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  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    蚕业科学
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    杨莹;王成林;徐家萍;尤征英;凌琳;周敬波
  • 通讯作者:
    周敬波

其他文献

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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