鸡志贺氏菌ESBLs分子生物学及相关特性研究

以鸡福氏志贺氏菌为研究对象，用PCR扩增法测定其所产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因型，用双脱氧末端终止法测定ESBLs基因的核苷酸序列并通过Genbank进行同源性分析，确定基因亚型，分析其耐药突变特征。将ESBLs编码的基因片段定向克隆到Pet-28表达载体，经IPTG诱导后，实现重组细菌的高效表达，表达的重组蛋白即ESBLs经SDS-PAGE电泳、表型检测确证后，提取纯化并测定其等电点，再研究其对抗生素的水解率及对酶抑制剂的敏感性，确定控制产ESBLs鸡志贺氏菌感染的有效药物组合。从分子水平上阐明细菌耐药机制，建立动物源致病菌ESBLs基因型研究的基本方法，为后续的耐药基因诊断芯片研究开发提供新基因资源，为进一步开展ESBLs菌的监测、ESBLs分子流行病学研究及其它耐药基因的筛选提供基础；为新兽药研究、抗生素的合理应用、ESBLs菌感染的药物治疗及流行控制提供理论依据。