新效正抑癌候选基因NESG1在鼻咽癌中功能鉴定及其分子基础初步研究

NESG1是本课题组1999年于人鼻咽上皮中克隆的基因。最近，申请者发现原提交编码序列存在着碱基替换和缺失突变,向NCBI提交修改申请，使其版本升级为NM_012337.2。半定量RT-PCR初步鉴定NESG1在鼻咽癌中表达明显下调或缺失。启动子区预测有CpG岛存在，对鼻咽癌细胞去甲基化处理后能明显恢复其表达，提示该基因是鼻咽癌抑癌候选基因。本项目拟在原工作基础上，MS-PCR等检测启动子区甲基化状态。常规分子生物学方法确证mRNA和蛋白在鼻咽癌中的表达情况。导入NESG1基因，建立其稳定过表达的鼻咽癌细胞系。在细胞和鼻咽癌原位可视化动物模型水平比较NESG1导入前后对鼻咽癌细胞周期，细胞生长、侵袭和转移的影响。利用全基因组芯片和蛋白表达分析技术分别研究NESG1基因导入前后所引起相应基因和蛋白表达差异，利用生物信息学寻找NESG1基因介导的重要信号转导通路。