蛋白质的糖基化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰。超过50%的细胞蛋白具有糖基化修饰，绝大多数的膜蛋白或分泌蛋白都是糖基化修饰蛋白，其糖链参与了包括细胞识别、细胞粘附、分化发育、信号转导、精卵结合、病原体感染、免疫应答等众多重要生命过程。同时在众多疾病的发生发展中均伴随有蛋白质糖基化异常的发生。因此蛋白质的糖基化研究对全面深入理解生命活动规律和疾病的发生发展机制具有重要意义。. 本项目研究的黏蛋白型O糖基化即O-GalNAc糖基化修饰是蛋白质糖基化修饰中一种普遍存在的糖基化修饰形式。目前已知的蛋白质O-GalNAc糖基化主要是发生在细胞高尔基体上，即蛋白质从内质网合成转移到高尔基，在高尔基体上由O-GalNAc糖基转移酶（ppGalNAc-T）发生初始的O-GalNAc糖基化修饰继而糖链延伸形成成熟的修饰蛋白，最终定位到细胞膜或分泌到细胞外形成具有功能的膜蛋白和分泌蛋白。因此目前广泛报道的O-GalNAc糖基化蛋白主要是黏蛋白型细胞膜蛋白或分泌蛋白。而这种修饰在胞浆或核蛋白上未见有报道和研究。. 本研究中我们通过体外高通量O-糖链初始糖基转移酶ppGalNAc-T的底物研究，首次发现了细胞内的胞浆或核定位蛋白存在O-GalNAc糖基化修饰。通过系统严谨的生物化学和细胞生物学实验，我们对细胞内定位的肿瘤抑制因子p53蛋白进行了详细研究，首次发现和证明了p53具有一种新的修饰即O-GalNAc糖基化修饰。发现该修饰调控不同于经典的O-GalNAc糖基化途径，有可能发生在细胞内囊泡样结构上；同时还初步发现在阿霉素等刺激下p53蛋白的O-GalNAc糖基化与其磷酸化修饰之间存在位点竞争关系，提示O-GalNAc糖基化参与维持细胞中p53蛋白稳定性。本研究首次报道了胞浆或核定位蛋白可以发生O-GalNAc糖基化修饰，向传统O-糖基化概念提出了挑战，拓展了我们对蛋白质糖基化多样性的认识。提出了细胞内可能存在促使胞浆或核蛋白发生O-GalNAc糖基化修饰的新途径和调控机制，为深入理解蛋白质O-糖基化功能多样性提供了创新性见解。.