食管癌干细胞中食管癌相关microRNAs的识别及其功能分析

本研究在对人染色体上食管癌常见缺失和扩增区段的miRNA基因识别的基础上，拟通过识别干细胞表面标志来分离并鉴定食管癌干细胞和食管上皮干细胞，应用实时荧光定量PCR分析食管癌干细胞和食管上皮干细胞中差异表达的miRNA，通过生物信息学预测其调控的靶基因并利用对miRNA的抑制或过表达模型分析miRNA是否在转录后水平调控靶基因的翻译。结合染色质免疫沉淀法进一步分析干细胞中miRNA调控对靶基因编码蛋白及其下游基因表达调控的影响，提出miRNA影响干细胞恶性转化的可能通路，并结合甲基苄基亚硝胺(NMBzA)诱导食管上皮干细胞恶性转化和癌变的细胞和动物模型，探讨miRNA在食管上皮恶性转化和肿瘤发生中的功能及其调控机制。结合对所筛miRNA的结构和功能分析，提出食管癌早期筛检的特异性miRNA指标，为食管癌早期诊断和治疗提供有效的生物标志物和潜在作用靶点。