肝脏前体细胞EMT后的逆转及其对细胞外基质合成与前体细胞特性的影响

肝脏前体细胞发生上皮-间质转化(EMT)后细胞外基质合成显著增加,但EMT的前体细胞能否发生间质-上皮转化(MET)及其生物学效应尚不清楚。本研究应用上皮细胞钙粘素的启动子调控绿色荧光蛋白表达的重组病毒感染肝脏前体细胞，建立研究EMT/MET细胞模型，应用转化生长因子(TGF)-beta1诱导EMT，然后去除TGF-beta1诱导EMT细胞发生MET，筛选重新表达上皮细胞钙粘素的EMT/MET转化细胞，证实肝脏前体细胞可以发生MET，并收集未重新表达上皮细胞钙粘素的EMT细胞；在此EMT/MET转变过程中前体细胞表型相关基因没有明显变化，EMT致细胞外基质相关基因表达增加、细胞增殖分化能力下降，MET后细胞外基质基因表达、细胞增殖分化能力、相关转录因子表达均回复至接近正常对照细胞水平；通过对诱导MET培养基的组分研究发现EGF具有阻断和拮抗TGF-beta1诱导EMT的作用，其作用机制是通过影响ERK1/2与Akt的磷酸化作用完成的。本研究为明确肝脏前体细胞在肝纤维进展和逆转中的行为与作用提供了实验依据。