廉价腐殖酸在食用油黄曲霉毒素大批量检测中的应用

Contamination of aflatoxins in edible oil is a important issue of the relationship between national economy and people's livelihood. In the current food safety testing industry, large-scale determination of aflatoxins in edible oils are faced with some problems that the existing analytical methods are tedious, high-cost, and poorly stable to perform. Therefore, it will consume lots of manpower and material resources while using these methods in the large-scale determination, and cause huge waste of social resources. For solving the above-mentioned problems, development of a new analytical method is extremely necessary. Currently, however, two problems are present while determining the aflatoxins in edible oils, i.e. trace content of target analyte and strong interference of matrix. We found humic acid as a rich, cheap, and natural adsorbent can effectively enrich aflatoxins and eliminate the interference of oil matrix in preliminary work. Additionally, solid-phase extraction is a sample pretreatment method with simple operation, easily large-scale determination, and reliable stabilization. Base on the above, this project intent to use humic acid as the adsorbent of solid-phase extraction, and develop a new sample pretreatment method which can be appropriate for large-scale determination of trace aflatoxins in edible oils. Implementation of this project is expected to achieves simple, low-cost, and reliable determination for aflatoxins in edible oils, and save large amounts of social resources, and thus provide a alternatively analytical method for food safety testing works of aflatoxins in edible oils.

食用油中黄曲霉毒素污染是关系国计民生的重大问题。目前在食品安全检测行业，食用油中黄曲霉毒素的大批量检测面临着检测方法操作繁琐、检测成本高昂，稳定性差的问题。因此，在进行大批量检测时将耗费大量的人力物力，对社会资源造成巨大的浪费。针对上述问题，开发新型的检测方法是十分必要的。目前，食用油中黄曲霉毒素的检测存在两个难题：目标分析物含量低和基质干扰严重。我们在前期调研中发现腐殖酸是一种丰富、廉价的天然吸附剂，可以有效地富集黄曲霉毒素并能去除油脂基质的干扰。此外，固相萃取技术是一种操作简单、易于批量处理和稳定可靠的样品前处理技术。基于此，本项目拟将腐殖酸作为固相萃取的吸附剂，开发一种新型的样品前处理方法，适用于食用油中痕量黄曲霉毒素的大批量检测。本项目的实施可望实现食用油中黄曲霉毒素简单、廉价、可靠的检测，并节省大量的社会资源，从而为食用油中黄曲霉毒素在食品安全领域的检测提供可替代的分析手段。

黄曲霉毒素对各种食品的污染已经发展成一个严重且频发的全球食品安全问题。目前，免疫亲和色谱法是食品黄曲霉毒素检测中最常规的一种样品净化方法。但是，由于免疫亲和色谱法需要使用昂贵的一次性免疫亲和柱，且免疫亲和过程费时，其在大批量食品分析中的应用会受到限制。本研究旨在开发一种基于商品化腐殖酸键合硅胶填料的固相萃取方法，结合液质联用技术有望实现食用油中黄曲霉毒素高效低成本的检测。在该方法中，黄曲霉毒素同时以亲水和疏水相互作用被腐殖酸键合硅胶捕集，而油基质仅仅依靠疏水相互作用被填料捕集。用异丙醇可以充分洗去油基质，反而黄曲霉毒素仍然保留在填料上，从而实现选择性富集黄曲霉毒素和净化油基质。在最优条件下，该方法在各种油基质中对四种黄曲霉毒素都实现令人满意的回收率（82‒106%），并产生微弱的基质效应（99‒105%）。并且，方法的检测限范围为0.012‒0.035 μg/kg，其完全符合欧盟、中国或其他国家对限值的规定要求。通过分析天然污染的花生油样品进一步验证方法学后发现，腐殖酸键合硅胶固相萃取法和参照的免疫亲和色谱法的检测结果一致。此外，腐殖酸键合硅胶固相萃取法能直接处理经过稀释的食用油样，无需进行事先的液液萃取，且可以自动化，这些使其成为一种简单方便的样品净化方法，适合于食用油黄曲霉毒素的大批量分析。.我们还开发了另一种基于商品化腐殖酸的分散固相萃取样品净化方法。六种腐殖酸原料的商品经过反复水洗和索氏提取处理后，可作为分散固相萃取填料使用。与腐殖酸键合硅胶固相萃取法类似，腐殖酸分散固相萃取法也能从不同类型的食用油中选择性提取黄曲霉毒素以及消除油基质对检测的干扰。在最优条件下，腐殖酸分散固相萃取法在各种油基质中对四种黄曲霉毒素都实现令人满意的回收率（81.3‒106.2%），同时产生微小的基质效应（89.3‒112.9%）可以忽略。使用一份天然污染的花生油样品对方法学进行进一步验证后，结果表明腐殖酸分散固相萃取法在准确性上可堪比经典的免疫亲和色谱法。另外，腐殖酸非常便宜且容易在当地市场上获得，腐殖酸分散固相萃取法可直接处理经过稀释的油样无需经过液液萃取和任何化学修饰。因此，对于分析食用油中的黄曲霉毒素，该方法简单、成本低，易适用，具有替代免疫亲和色谱法的潜力。.

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