TP53基因调控的microRNAs用于鼻咽癌基因治疗和预后预测

本项目首先在鼻咽癌HNE2细胞系中过表达TP53，并在转染后0 h、12 h、24 h和48 h收集样本，进行mRNA、miRNA和lncRNA芯片杂交。.芯片筛选出TP53相关差异表达的mRNAs主要参与：Cell cycle、p53 signaling pathway、Pyrimidine metabolism、DNA replication等。将差异表达的mRNAs与GSEA的p53靶基因进行比对，并将p53过表达的HNE2中差异表达的mRNA和lnRNA与鼻咽癌组织中差异表达的mRNAs和lnRNA数据（GSE61218）对比发现。将表达显著差异的miRNAs和mRNAs上传到Ingenuity Pathways Analysis (IPA)并构建鼻咽癌细胞中的miRNAs-mRNAs-lncRNAs共表达相互作用网络。.挑选其中lncRNA LOC401317进一步深入研究，发现LOC401317启动子区域进行荧光素酶活性分析发现p53能明显诱导包含野生型p53结合位点序列的荧光素酶活性，表明p53 通过与LOC401317转录起始位点上游p53结合位点结合，直接调控LOC401317的表达。MTT实验发现LOC401317能明显抑制细胞增殖。流式细胞检测显示LOC401317过表达的细胞阻滞在G0/G1期，并促进细胞凋亡。LOC401317上调p21，下调Cyclin D1和 Cyclin E1的表达；诱导PARP和Caspase-3的裂解。裸鼠成瘤显示LOC401317 明显抑制肿瘤生长，促进p21、Caspase-3表达上调，而Cyclin D1和Cyclin E1表达下调。.本课题在鼻咽癌细胞系HNE2中过表达TP53基因，通过miRNA和lncRNA芯片检测，筛选出一些受TP53基因调控的miRNAs、mRNAs和 lncRNAs 分子，这些分子形成复杂的miRNAs-mRNAs调控网络，参与细胞周期进程、DNA损伤修复等。本课题还对LOC401317进行初步研究。发现LOC401317受到p53的直接转录调控，通过促进细胞周期G1/S期阻滞和诱导细胞凋亡，抑制鼻咽癌细胞HNE2的增殖。LOC401317可能成为鼻咽癌基因治疗潜在的新靶点，为鼻咽癌的治疗提供了一条新的途径。