DCs表面PIR-A/PIR-B受体平衡失调在Th17/Treg分化和创伤免疫紊乱中的作用
结题报告
批准号:
81401584
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
23.0 万元
负责人:
王坤
依托单位:
学科分类:
H1701.创伤
结题年份:
2017
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
王国年、吴华星、谷静、顾广英、孙学超、张明月、文雯
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中文摘要
创伤可致机体免疫失衡,其发病机制未完全阐明。PIR-A/PIR-B作为新发现DCs表面受体参与调节免疫反应。我们前期研究发现,创伤后DCs表面刺激性PIR-A和抑制性PIR-B受体表达异常,最近又发现PIR-A/PIR-B参与DCs介导Th17/Treg平衡,而该平衡是维持免疫稳态的关键,此平衡失调可致免疫失衡,因此我们推测PIR-A/PIR-B受体通过调控DCs介导Th17/Treg平衡参与创伤免疫紊乱发生。为此本课题拟进行以下研究:(1)明确创伤后存在PIR-A/PIR-B表达异常和Th17/Treg失衡;(2)体外观察靶向干扰PIR-A/PIR-B表达对Th17/Treg平衡和免疫功能影响;(3)探讨PIR-A/PIR-B调控Th17/Treg平衡的分子机制;(4)在体观察过表达/沉默PIR-A/PIR-B能否纠正创伤后Th17/Treg失衡和免疫紊乱,为创伤免疫失衡防治提供新策略。
英文摘要
Trauma contributes to the imbalance of immune function, and its formation mechanism has not been fully elucidated. Complementary PIR-A/PIR-B receptor is a newly discovered DCs surface receptor involved in regulating immune response. Our previous experiment showed that PIR-A/PIR-B receptor expression on the DCs surface was abnormal after trauma, recently found that PIR-A/PIR-B receptor was involved in the balance of the DCs mediated Th17/Treg, and the balance is the key to maintaining immune steady state, this balance disorders can cause immune imbalance, so we speculated that PIR-A/PIR-B receptor can participate in the immune dysfunction after trauma by regulating the balance of Th17/Treg. Aims of this study were to investigate: (1) the expression of PIR-A/PIR-B activity on the DCs surface and Th17/Treg cells in the peripheral blood of traumatic patients, and (2) in vitro interferent the balance of PIR-A/PIR-B receptor activity can regulate the imbalance of Th17/Treg cells and improve the immune function, and (3) to explore the molecular mechanism of Th17/Treg imbalance, and (4) in the animal experimental to study “overexpression or silence of PIR-A/PIR-B” DCs can reverse the imbalance of Th17/Treg cells and improve immune function after trauma, so as to provide a new strategy for treating the immune dysfunction after trauma.
创伤可致机体免疫失衡,其发病机制未完全阐明。本实验从T细胞亚群平衡角度,观察创伤对小鼠脾脏Th17/Treg细胞、细胞因子和转录因子表达的影响;从DCs表面受体表达入手,观察创伤对小鼠脾脏DCs免疫功能影响;并探讨DCs表面Pir-B分子调控创伤后Th17/Treg失衡的分子机制。制作创伤出血小鼠模型,采用免疫磁珠分选CD4+T细胞和CD11c+DCs;MTT法检测T细胞增殖,流式检测Th17/Treg细胞;ELISA检测IL-17和TGF-β含量;PCR检测子RoRγt和Foxp3 mRNA表达;并分析DCs细胞数量、表面分子MHC-II、CD80、CD86和抑制性分子Pir-B表达,ELISA检测DCs分泌IL-6、IL-10和IL-12含量;通过体外靶向过表达或沉默Pir-B,观察上述指标变化。结果发现:小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显降低,且最低水平出现在创伤后3天;创伤小鼠脾脏Th17细胞比例、IL-17及RoRγt mRNA表达明显降低,而Treg细胞比例、TGF-β和Foxp3 mRNA表达明显增加;创伤小鼠脾脏DCs细胞数量无明显变化;创伤小鼠脾脏DCs表面MHC-II、CD86表达明显下降,IL-6和IL-12含量明显减少;创伤小鼠脾脏DCs表面Pir-B表达明显增加;创伤DCs转染siRNA-Pir-B后1、2、3和5天,siRNA-DC组Pir-BmRNA和蛋白表达明显降低;转染后3天,siRNA-DC组MHC-II表达和IL-6含量明显增加;与初始T细胞共培养后,siRNA-DC组Th17细胞比例和IL-17含量明显增加,Treg细胞比例明显降低,TGF-β含量无明显变化;共培养体系中加入1µg、5µg和10µg anti-IL-6抗体后,与Saline组比较,5µg和10µg anti-IL-6组Th17细胞比例明显降低,IL-17含量、Treg细胞和TGF-β含量无明显变化。结论:创伤出血致小鼠脾脏Th17/Treg细胞失衡,参与创伤后免疫抑制形成;创伤出血抑制DCs功能,促进抑制性Pir-B分子表达增加;靶向沉默Pir-B表达,可恢复DCs介导的Th17/Treg失衡和改善免疫功能,且该调控作用是通过IL-6通路来实现的。通过本项目研究进一步阐明创伤免疫抑制发生机制,并为临床创伤后免疫功能紊乱防治提供理论依据。
期刊论文列表
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科研奖励列表
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专利列表
DOI:10.3892/mmr.2014.2740
发表时间:2015-01-01
期刊:MOLECULAR MEDICINE REPORTS
影响因子:3.4
作者:Wang, Kun;Wu, Huaxing;Li, Hulun
通讯作者:Li, Hulun
Pir-B inhibits the DC function and disturbs the Th17/Treg balance in lung cancer murine model.
Pir-B在肺癌小鼠模型中抑制DC功能并扰乱Th17/Treg平衡
DOI:10.18632/oncotarget.21763
发表时间:2017-12-29
期刊:Oncotarget
影响因子:--
作者:Wu H;Zheng X;Dong L;Li C;Zhang M;Wang G;Wang K
通讯作者:Wang K
DOI:10.1159/000373965
发表时间:2015-03
期刊:Cellular Physiology and Biochemistry
影响因子:--
作者:Huaxing Wu;Guonian Wang;Shuai Li;Mingyue Zhang;Hulun Li;Kun-Kun Wang-Kun
通讯作者:Huaxing Wu;Guonian Wang;Shuai Li;Mingyue Zhang;Hulun Li;Kun-Kun Wang-Kun
DOI:10.3892/etm.2015.2913
发表时间:2016-02-01
期刊:EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE
影响因子:2.7
作者:Wu, Huaxing;Wang, Kun;Li, Yu
通讯作者:Li, Yu
LncRNA ZSWIM8-AS1调控脓毒症Tfh/Tfr分化失衡的机制及作为重症标志物的预后价值研究
  • 批准号:
    82272427
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    52万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    王坤
  • 依托单位:
国内基金
海外基金