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调控星形胶质细胞PRRs/ASC/caspase-1炎性体对骨髓基质干细胞存活与分化的作用机制研究
结题报告
批准号:
81501050
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
17.5 万元
负责人:
梁洪生
依托单位:
学科分类:
H0910.神经损伤、修复与再生
结题年份:
2018
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
高爱丽、张立阳、李永华、孙勇、康传杰、徐林
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中文摘要
脊髓损伤后的微环境导致干细胞移植后死亡并降低向神经元分化比例,使干细胞难以有效地修复脊髓损伤。本实验室前期研究发现利用骨髓基质干细胞种植于去细胞人羊膜支架上的策略对破损硬脊膜修补时,炎症反应明显减弱,从而改善了脊髓损伤的局部微环境,最终促进骨髓基质干细胞的存活及向神经元分化提高大鼠肢体功能。为了深入研究脊髓损伤后炎症反应对植入干细胞作用的分子机制,本实验拟利用凋亡相关的斑点样蛋白小干扰RNA和胱天蛋白酶-1抑制剂调控星形胶质细胞PRRs/ASC/caspase-1炎性体传导通路;采用RT-PCR、western blot方法检测该通路相关蛋白表达水平,及免疫组织化学法检测对骨髓基质干细胞存活与分化的影响,在体评估骨髓基质干细胞促进脊髓损伤后轴突再生、神经环路重建及肢体功能恢复程度。对该通路的深入研究有可能发现促进骨髓基质干细胞存活与分化新的作用靶点,为脊髓损伤的修复提供新的治疗手段。
英文摘要
It is difficult for stem cells to effectively repair spinal cord injury (SCI), because of the death and the lower neuronal differentiation rate of the transplanted stem cells produced in the microenvironment after SCI. In our previous experiment, the inflammation reaction was reduced by repairing broken dura with the bone marrow stromal cells (BMSCs) seeded on the denuded human amniotic membrane, then the local microenvironment was improved to ultimately promote BMSCs survival and neuronal differentiation for improving the rat limbs function. To further study the molecular mechanisms of the transplanted stem cells produced by the inflammation reaction after SCI, in this experiment, we will regulate the pathway of astrocytes’PRRs/ASC/caspase-1 inflammasome by the apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD small interfering RNA (ASC siRNA) and caspase-1-inhibitor (AC-YVAD-CMK), test the expression levels of the related protein in this pathway with the RT-PCR and western blot ways, detect the effects of BMSCs on survival and neuronal differentiation by the immunohistochemical method, and evaluate the degree of axonal regeneration, neural circuit reconstruction and limbs function improved by BMSCs. The novel targets may be found to promote BMSCs survival and differentiation by further research on this pathway for a new treatment repairing SCI.
脊髓损伤后的微环境导致干细胞移植后死亡并降低向神经元分化比例,使干细胞难以有效地修复脊髓损伤。本实验室前期研究发现利用骨髓基质干细胞种植于去细胞人羊膜支架上的策略对破损硬脊膜修补时,炎症反应明显减轻,从而改善了脊髓损伤的局部微环境,部分促进骨髓基质干细胞的存活及向神经元分化提高大鼠肢体功能。本研究旨在进一步提高BMSCs的存活率和分化率,我们首先利用capase-1抑制剂(AC-YVAD-CMK)证实抑制炎症通路相关蛋白可以有效地提高BMSCs存活率及分化率;其次,体外培养形态一致及纯度高的星形胶质细胞,并活化;再次,成功构建ASC siRNA及 ASC shRNA,并转染活化的星形胶质细胞,有效地抑制活化的星形胶质细胞表达ASC蛋白;最后,原代培养BMSCs并与活化的星形胶质细胞(转染及未转染ASC siRNA)共培养,检测到转染组BMSCs向神经元分化的程度明显提高。本项目相关研究正在整理、投稿过程中。与此同时,申请人发表一篇关于蛛网膜下腔出血临床研究的论著,与合作单位发表关于胶质瘤研究论文SCI收录两篇;在此过程中共培养硕士研究生五名。本研究有益于了解干细胞移植治疗脊髓损伤的理论基础,对未来脊髓损伤的临床治疗具有一定指导意义。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Ivermectin inhibits the growth of glioma cells by inducing cell cycle arrest and apoptosis in vitro and in vivo
伊维菌素通过在体外和体内诱导细胞周期停滞和细胞凋亡来抑制神经胶质瘤细胞的生长。
DOI:10.1002/jcb.27420
发表时间:2019-01-01
期刊:JOURNAL OF CELLULAR BIOCHEMISTRY
影响因子:4
作者:Song, Dandan;Liang, Hongsheng;Gao, Aili
通讯作者:Gao, Aili
Risk Factors for Infections Related to Lumbar Drainage in Spontaneous Subarachnoid Hemorrhage
自发性蛛网膜下腔出血腰椎引流相关感染的危险因素
DOI:10.1007/s12028-015-0239-1
发表时间:2016-10-01
期刊:NEUROCRITICAL CARE
影响因子:3.5
作者:Liang, Hongsheng;Zhang, Liyang;Zhang, Xiangtong
通讯作者:Zhang, Xiangtong
DOI:10.16695/j.cnki.1006-2947.2016.04.029
发表时间:2016
期刊:解剖科学进展
影响因子:--
作者:李永华;梁洪生;张立阳;张相彤
通讯作者:张相彤
DOI:--
发表时间:2018
期刊:临床与病理杂志
影响因子:--
作者:王向前;梁洪生;程兴博;马威;张立阳;张相彤
通讯作者:张相彤
Moxidectin inhibits glioma cell viability by inducing G0/G1 cell cycle arrest and apoptosis
Moxyectin 通过诱导 G0/G1 细胞周期停滞和细胞凋亡来抑制神经胶质瘤细胞活力。
DOI:10.3892/or.2018.6561
发表时间:2018-09-01
期刊:ONCOLOGY REPORTS
影响因子:4.2
作者:Song, Dandan;Liang, Hongsheng;Gao, Aili
通讯作者:Gao, Aili
蓓萨罗丁调控Myf5促进BMSCs减轻脑出血后骨骼肌萎缩的作用机制研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    51万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    梁洪生
  • 依托单位:
蓓萨罗丁调控MyoD促进肌卫星细胞增殖分化在脊髓损伤后骨骼肌萎缩中的作用及机制研究
  • 批准号:
    82071368
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    梁洪生
  • 依托单位:
国内基金
海外基金