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利用荷电效应分离纯化G蛋白偶联受体的膜过程研究
结题报告
批准号:
20906104
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
19.0 万元
负责人:
刘建国
学科分类:
B0804.分离工程
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
葛保胜、柳志强、俞继仙、王晶冰、杨娟、张志强
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中文摘要
G蛋白偶联受体(GPCRs)是细胞整合膜蛋白,也是现代药物研发的重要靶点,在细胞信号传递中发挥着重要作用。其原子级精细结构的解析可以促进人类对自身免疫性、传染性、过敏性等多种疾病发病机理的研究,同时大大提高结构依赖性药物设计的针对性。由于膜蛋白结构复杂、稳定性差,加之传统分离工艺的过程复杂、耗时较长,导致膜蛋白损失率高达90%。因此,GPCRs的提纯技术是目前研究其结构的主要瓶颈之一。.本研究拟选择与人类过敏性疾病密切相关的CCR3作为代表,在前期实现重组表达的基础上,采用膜技术建立CCR3粗产品制备新工艺;利用新型超滤技术,通过分离条件的系统优化,实现CCR3的分离与纯化;通过膜分离过程的放大研究,获得CCR3规模化制备,解决目前GPCRs分离纯化困难、制备数量少、损失严重等关键技术问题,为今后GPCRs的结构生物学研究提供充分的物质基础,并为其他种类膜蛋白的超滤提取提供相关科学依据。
英文摘要
本项目在实现G蛋白偶联受体CCR3重组表达的基础上,建立并系统研究了以超滤为核心技术的CCR3新型分离提取技术。首先通过考察超滤操作条件对CCR3稳定性的影响,确定了超滤工艺参数的优化范围;其次利用参数扫描超滤技术对分离条件进行了系统优化,获得了CCR3最佳超滤分离工艺;最后利用Pall公司Centramate超滤系统对CCR3的超滤分离过程进行了放大研究。在最佳分离条件下,CCR3纯度可达95%,回收率为86%。本项目的研究成果解决了目前膜蛋白分离纯化困难、制备数量少、损失严重等关键技术问题,可为今后CCR3的结构生物学研究提供充分的物质基础,并为其他种类膜蛋白的超滤提取提供相关科学依据。
期刊论文列表
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DOI:--
发表时间:--
期刊:Internation Journal of Food Engineering
影响因子:--
作者:Jianguo Liu;Juan Yang;Hai Xu;Hu Zhu;Jianbo Qu;Jianren Lu;Zhanfeng Cui
通讯作者:Zhanfeng Cui
DOI:10.1016/j.memsci.2012.09.020
发表时间:2013
期刊:Journal of Membrane Science
影响因子:9.5
作者:Jianguo Liu;C. Chen;Baosheng Ge;Jianren Lu;Z. Cui
通讯作者:Jianguo Liu;C. Chen;Baosheng Ge;Jianren Lu;Z. Cui
A novel membrane-based process to isolate peroxidase from horseradish roots: optimization of operating parameters
一种从辣根根中分离过氧化物酶的新型膜工艺:操作参数优化
DOI:10.1007/s00449-012-0781-6
发表时间:2013-02
期刊:Bioprocess and Biosystems Engineering
影响因子:3.8
作者:Jianguo Liu;Bo Yang;Changzhen Chen
通讯作者:Changzhen Chen
A novel membrane based process to isolate photosystem-I membrane complex from spinach
一种从菠菜中分离光系统-I膜复合物的新型膜工艺
DOI:10.1007/s11120-011-9625-5
发表时间:2011-01
期刊:Photosynthesis Research
影响因子:3.7
作者:Jianguo Liu;Mengmen Yin;Meng Wang;Xuefang Zhang;Baosheng Ge;Shuang Liu;Jianren Lu;Zhanfeng Cui
通讯作者:Zhanfeng Cui
DOI:10.1016/j.fbp.2010.07.003
发表时间:2011-10-01
期刊:FOOD AND BIOPRODUCTS PROCESSING
影响因子:4.6
作者:Liu, Jianguo;Wang, Jingbing;Cui, Zhanfeng
通讯作者:Cui, Zhanfeng
基于磷脂纳米盘(Nanodiscs)体系的G蛋白偶联受体激活过程的构象变化研究
  • 批准号:
    21473256
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    86.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    刘建国
  • 依托单位:
液固两相流对弯管的腐蚀磨损耦合破坏机制研究
  • 批准号:
    51301201
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    25.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    刘建国
  • 依托单位:
膜蛋白光系统I(Photosystem I)的超滤分离过程研究
  • 批准号:
    21276280
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    78.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    刘建国
  • 依托单位:
国内基金
海外基金