miR-133a 通过负调控HLA-G参与反复自然流产的分子机制

批准号:
81370710
项目类别:
面上项目
资助金额:
70.0 万元
负责人:
王晓红
依托单位:
学科分类:
H0415.胚胎着床、母胎互作与生殖免疫及相关疾病
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
李博、赵宏喜、王珺、肖西峰、姜锋、马夜肥、张顺、李建波、马媛
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
微信扫码咨询
中文摘要
反复自然流产(RSA)是导致不孕不育的重要原因之一。特异表达于人类绒毛外滋养层细胞(EVC)的HLA-G分子诱导的母胎免疫耐受,是保障早期妊娠顺利进行的关键,但调控HLA-G表达的具体分子机制迄今尚未阐明,因此无法建立针对性的RSA特异疗法。我们在既往研究的基础上,提出miR-133a负调控HLA-G参与RSA发生,提示,通过调控miR-133a表达,有可能重建或者恢复RSA患者母胎界面正常的免疫耐受。为此,本研究拟采用流式细胞术、基因表达分析、Elisa等技术,在绒毛和TEV-1细胞系中,观察miR-133a表达的时空特异性以及对HLA-G亚型的特异性调控和对EVC免疫功能的调节作用,进而在人类早期胚胎中,验证miR-133a对早期妊娠结局的潜在影响,探讨miR-133a参与RSA发生的分子机理,揭示RSA发病的新机制,为寻找新的治疗靶点提供依据,具有重要的理论和实际意义。
英文摘要
Recurrent Spontaneous Abortion (RSA) is one of the most important reasons of infertility. HLA-G is specific expressed in extravillous trophoblast cell (EVC), which avoid the fetus immunologic rejected by mother and play a key role in successful pregnancy. However, so far, the molecular mechanism of HLA-G expressed regulation is still unknow, hence, could not establish the specific clinical treatment of RSA. On our previous study, we believed that miR-133a mediated RSA by down-regulating HLA-G expression, which suggested that we might restored the immune tolerance in the maternal-fetal interface by regulating miR-133a expression. Therefore, we would apply flow cytometry, gene expression and Elisa etc technologies, to observed the spatio-temporal specificity of miR-133a expression and the regulatory role of HLA-G isoform and EVE immune function in the villi tissue and TEV-1 cell line, to further verify the potential effect in the early pregnance, to approach the molecular mechanism of miR-133a mediating RSA. The study will reveal a new mechanism of pathogenesis of RSA and provide a new target for clinical cure, which have important academic and practical significances.
复发性流产(RSA)是常见的妊娠并发症,免疫学异常是导致RSA的重要原因。已研究表明HLA-G低表达与RSA密切相关。妊娠早期,CD56bright 自然杀伤细胞(nature killer,NK)大量聚集在母体蜕膜组织中,直接与胎儿的绒毛外滋养层细胞(EVT)接触,可通过促进EVT向母体侵袭、促进子宫血管形成及螺旋动脉重塑、促进免疫耐受三方面维持正常妊娠。但是目前对HLA-G与蜕膜NK细胞(dNK)在反复自发流产过程中的作用,尚不清楚。.在本项目中,我们主要研究内容包括:筛选出了与HLA-G表达相关的miR-133a,且证实了miR-133a在RSA流产绒毛高表达,且其通过作用于HLA-G的3’非编码区负调控HLA-G的表达;进一步研究了miR-133a高表达可抑制滋养层细胞的侵袭和粘附,促进滋养层细胞的凋亡;最后发现miR-133a通过负调控HLA-G的表达,影响蜕膜NK细胞功能,进而抑制母胎血管网络的建立,最终引起流产。.我们发现,RSA患者dNK 细胞KIR2DL4受体较人工流产患者表达显著下调(P<0.05)。RSA患者dNK分泌IP-10、VEGF显著降低,这两种细胞因子前者为促侵袭因子,后者为促血管形成因子。RSA患者dNK分泌的细胞因子使 HTR-8/SVneo细胞侵袭能力显著减弱,使HUVECs血管生成能力显著减弱。转染了miR-133a inhibitor 的HTR-8/SVneo细胞高表达HLA-G,转染了miR-133a mimics的HTR-8/SVneo细胞低表达HLA-G。共培养体系中,与转染了miR-133a mimicis的HTR-8/SVneo细胞共培养的上清IL-8、IP-10、VEGF细胞因子浓度都显著降低(P<0.05),培养上清使HTR-8/SVneo细胞侵袭能力显著减弱,使HUVECs血管生成能力显著减弱。加入KIR2DL4抗体的共培养体系上清上述细胞因子浓度也显著降低,上清同样使HTR-8/SVneo细胞侵袭能力显著减弱,使HUVECs血管生成能力显著减弱。.我们的研究表明miR-133a负调控HLA-G可能通过KIR2DL4调节dNK细胞的分泌功能,进而影响滋养层细胞侵袭和血管形成,为深入探讨导致RSA发生的机制提供可能的理论依据以及为治疗RSA提供可能的靶点。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.1095/biolreprod.115.136325
发表时间:2016-03
期刊:
影响因子:--
作者:Bo Li;Xi-feng Xiao;Shuqiang Chen;Jianlei Huang;Ye-fei Ma;Na Tang;Huijun Sun;Xiaohong Wang
通讯作者:Bo Li;Xi-feng Xiao;Shuqiang Chen;Jianlei Huang;Ye-fei Ma;Na Tang;Huijun Sun;Xiaohong Wang
Decreased Human Leukocyte Antigen-G Expression by miR-133a Contributes to Impairment of Proinvasion and Proangiogenesis Functions of Decidual NK Cells.
mir-133a 降低人类白细胞抗原 G 表达导致蜕膜 NK 细胞的前侵袭和促血管生成功能受损
DOI:10.3389/fimmu.2017.00741
发表时间:2017
期刊:Frontiers in immunology
影响因子:7.3
作者:Guo W;Fang L;Li B;Xiao X;Chen S;Wang J;Yang F;Chen L;Wang X
通讯作者:Wang X
DOI:--
发表时间:2016
期刊:陕西医学杂志
影响因子:--
作者:巨瑛;吴静;黄剑磊;刘芳;马夜肥;王晓红
通讯作者:王晓红
DOI:--
发表时间:2015
期刊:生殖医学杂志
影响因子:--
作者:刘媛;李博;陈书强;王东;孙惠君;董杰;周晶;郭雯娓;王晓红
通讯作者:王晓红
DOI:--
发表时间:2015
期刊:中国优生与遗传杂志
影响因子:--
作者:刘媛;李博;陈书强;王晓红
通讯作者:王晓红
COH高雌激素环境通过抑制p65核转位影响子宫trNK细胞增殖和分化致胎盘形态和功能异常的机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:52万元
- 批准年份:2022
- 负责人:王晓红
- 依托单位:
COH高雌激素状态通过ER-α介导TET2高表达影响卵母细胞“胎盘特异性母源甲基化”致子代低出生体重的机制研究
- 批准号:82071717
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:54万元
- 批准年份:2020
- 负责人:王晓红
- 依托单位:
含HLA-G外泌体通过影响蜕膜NK细胞功能参与早期复发性流产的机制研究
- 批准号:81871182
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:57.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:王晓红
- 依托单位:
ART影响印记基因Phlda2表达致胎盘发育及功能异常的机制研究
- 批准号:81671463
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:57.0万元
- 批准年份:2016
- 负责人:王晓红
- 依托单位:
国内基金
海外基金
