根据国家自然基金计划书的要求我们完成了标书和计划书中的研究任务，经费的使用严格按照预算，并且发表了相关的文章：.1）Zhao Z, Lu P, Zhang H, Xu H, Gao N, Li M, Liu C.Nestin positively regulates the Wnt/β-catenin pathway and the proliferation, survival and invasiveness of breast cancer stem cells.Breast Cancer Res. 2014 Jul 24;16(4):408..2) Gao N, Xu H, Liu C, Xu H, Chen G, Wang X, Li Y, Wang Y.Nestin: predicting specific survival factors for breast cancer..Tumour Biol. 2014 Mar;35(3):1751-5. .研究摘要：我们选取150乳腺癌标本来源于2003年1月-2006年12月年间就诊于中国医科大学第一附属医院肿瘤外科和辽宁省肿瘤医院并行乳腺癌根治手术治疗的乳腺癌患者，实验通过了中国医科大学伦理委员会的批准。组织中Nestin蛋白的表达检测应用免疫组织化学（IHC）方法；CD44+/CD24- CSC分选采用免疫荧光抗体标记后流式细胞仪二次分选，CSC培养采用低粘附培养板下的无血清悬浮培养；细胞转染采用LipofectamineTM2000脂质体转染试剂进行；TGF-处理细胞诱导细胞上皮间质化（EMT）；蛋白和mRNA表达检测分别采用Western Blot和RT-PCR，细胞成瘤能力检测采用SCID鼠成瘤试验，细胞侵袭力检测采用Trans Well的方法检测。结果表明癌组织中有27.33%患者癌细胞胞浆内可检测到Nestin的表达；进一步研究表明三阴性乳腺癌患者中，Nestin阳性表达的患者生存期较Nestin阴性的患者明显缩短。Nestin+ 的乳腺癌干细胞致瘤性较Nestin-的乳腺癌干细胞强。我们结果表明Nestin 沉默后抑制了乳腺癌干细胞自发EMT过程，其机制与激活Wnt/-catenin通路有关。