课题基金基金详情
石斑鱼网格蛋白(clathrin)介导虹彩病毒SGIV侵染宿主细胞的分子机制
结题报告
批准号:
41606183
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
王劭雯
依托单位:
学科分类:
D0604.生物海洋学与海洋生物资源
结题年份:
2019
批准年份:
2016
项目状态:
已结题
项目参与者:
李鹏飞、俞也频、尼松伟、王伟、陈秀丽
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
石斑鱼是我国南方及东南亚各国重要的海水名贵养殖鱼类之一,病害频发严重影响其可持续健康发展,石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是重要的传染性病原之一。我们的前期研究表明,网格蛋白介导的内吞(clathrin mediated endocytosis,CME)是SGIV侵染宿主细胞的重要途径之一。网格蛋白(clathrin)作为CME的标志性蛋白对病毒侵染有重要作用。然而,目前有关SGIV如何利用clathrin侵染宿主细胞的精细作用机制仍不十分清楚。因此,本项目拟克隆石斑鱼clathrin基因,通过多种技术研究clathrin对SGIV侵染宿主细胞的影响,及二者的动态作用过程,并初步鉴定与clathrin相互作用蛋白,从而揭示clathrin介导SGIV侵染宿主细胞的机制。研究结果将进一步阐明虹彩病毒的致病机理,并促进发展新的抗病毒策略。
英文摘要
Grouper, Epinepheus spp., is among the most important marine-cultivated fishes in the southern coastal areas of China and Southeast Asia, but viruses, such as Singapore grouper iridovirus (SGIV), one of the most important viral pathogens in culturing groupers and other marine fishes, have already highly threatened the health of the fish thus the sustainable development of grouper aquaculture. Based on the previous studies, clathrin- mediated endocytosis (CME) is crucial in SGIV entry, and as the marker protein of CME, clathrin plays vital role in virus infection. However, the detailed mechanisms how SGIV infects host cells through CME remain largely unknown. To reveal the mechanisms of clathrin mediated SGIV entry and then to improve antiviral drug design, we will in this study clone the grouper clathrin gene, take advantage of combined technologies to study the effect of clathrin on SGIV infection, investigate the dynamic interactions between SGIV and clathrin in living cells and in the end identify protein complex of clathrin.
SGIV可通过网格蛋白介导的内吞途径进入宿主细胞,然而有关网格蛋白,特别是CLC如何介导SGIV侵染宿主细胞的精细过程报道还很少。本研究从石斑鱼中克隆鉴定了网格蛋白轻链的两个亚型,CLCa和CLCb,其中CLCa编码202个氨基酸, CLCb编码205个氨基酸。CLCa和CLCb在脾、肾和肠等组织中均有分布,并且CLCa的转录水平高于CLCb。亚细胞定位表明,CLCa和CLCb分布于细胞质和细胞膜上,且在SGIV感染晚期,CLCa和CLCb均围绕在病毒加工厂附近。通过分别构建CLCa和CLCb的显性负性突变体CLCa-W119R和CLCb-W122R,破坏轻链与重链的结合,分析了CLCa和CLCb在虹彩病毒感染过程中的作用。结果表明,破坏CLCa显著抑制SGIV感染,而破坏CLCb对病毒感染无显著影响。利用共聚焦显微镜成像技术等方法,我们进一步发现破坏CLCa会显著抑制SGIV病毒粒子的进入及进入后向早期内体的运输,并且显著降低SGIV与微丝的共定位,但不影响病毒的黏附。然而,破坏CLCb对SGIV的黏附、进入以及与Rab5、微丝的共定位均无显著影响。同时,利用单粒子示踪技术实时追踪了SGIV利用CLCa进入宿主细胞的动态过程。以上研究揭示了CLCa和CLCb对虹彩病毒感染的不同影响,并实时追踪了SGIV利用网格蛋白进入宿主细胞的动态过程,有助于深入理解海水鱼类虹彩病毒的感染和致病机理。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
PPAR-δ of orange-spotted grouper exerts antiviral activity against fish virus and regulates interferon signaling and inflammatory factors
橙斑石斑鱼的 PPAR-γ 对鱼类病毒发挥抗病毒活性,并调节干扰素信号传导和炎症因子
DOI:--
发表时间:2019
期刊:Fish Shellfish Immunol.
影响因子:--
作者:Wang Y;Yu Y;Wang Q;Wei S;Wang S;Qin Q;Yang M
通讯作者:Yang M
Transcriptomics analysis reveals candidate genes and pathways for susceptibility or resistance to Singapore grouper iridovirus in orange-spotted grouper (Epinephelus coioides).
转录组学分析揭示了橙斑石斑鱼(斜带石斑鱼)对新加坡石斑鱼虹彩病毒的易感性或抗性的候选基因和途径
DOI:10.1016/j.dci.2018.09.003
发表时间:2019-01
期刊:Developmental and comparative immunology
影响因子:2.9
作者:Yang M;Wang Q;Wang S;Wang Y;Zeng Q;Qin Q
通讯作者:Qin Q
The roles of grouper clathrin light chains in regulating the infection of a novel marine DNA virus, Singapore grouper iridovirus
石斑鱼网格蛋白轻链在调节新型海洋 DNA 病毒新加坡石斑鱼虹彩病毒感染中的作用
DOI:10.1038/s41598-019-51725-5
发表时间:2019-10
期刊:Scientific Reports
影响因子:4.6
作者:Wang L;Li Q;Ni S;Huang Y;Wei J;Liu J;Yu Y;Wang S;Qin Q
通讯作者:Qin Q
在单分子水平研究石斑鱼虹彩病毒SGIV基因组DNA在宿主细胞内的释放机制
  • 批准号:
    41976104
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    62.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    王劭雯
  • 依托单位:
国内基金
海外基金