布鲁氏菌侵染胚胎滋养层细胞过程中关键分子的功能研究

布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌引起的一类动物源性人兽共患病，在世界范围内广泛流行，尤其是发展中国家。近几年回升势头迅猛，引起了世界范围的广泛关注。布鲁氏菌病疫情日趋严重，由该病引发的母畜流产是造成畜牧业巨大经济损失。布鲁氏菌流产相关因子与胚胎滋养层细胞关键分子的相互作用，在布鲁氏菌引发母畜流产过程中起关键作用。课题组前期采用酵母双杂交技术获得了与布鲁氏菌流产相关因子Omp25互作的4个胚胎滋养层细胞关键分子，在此基础上，本研究进一步揭示了这些关键分子在布鲁氏菌侵染过程中的功能。课题组采用免疫共沉淀技术验证4个胚胎滋养层细胞关键分子，证实布鲁氏菌OMP25与HPT-8的Ferritin、hypothetical LOC339123出现了配合。并利用RNA干扰技术检测这些分子表达沉默前后抑制了布鲁氏菌增殖。将Omp25蛋白和关键分子进行标记，采用激光共聚焦显微镜、电镜技术确定Omp25蛋白与关键分子在胚胎滋养层细胞中互作的定位，证实布鲁氏菌Omp25蛋白位于细胞的液泡中，也存在于胞液中。通过本研究，为揭示布鲁氏菌引发流产的分子机制提供线索，也为布鲁氏菌病新药物研发、防治及家畜抗病育种工作奠定基础。