钙敏感受体在脓毒血症大鼠外周血淋巴细胞分泌细胞因子中的作用和机制

本课题利用盲肠结扎穿孔术(CLP) 制作了脓毒症大鼠模型；Western blot检测了钙敏感受体（CaSR）蛋白、通道蛋白、TRPCs蛋白在淋巴细胞中的表达，同时检测了CaSR激动剂及NF-κB和MAPK信号传导通路阻断剂对淋巴细胞上相关信号传导通路蛋白的影响；ELISA检测了CaSR活化及NF-κB和MAPK信号传导通路阻断剂对淋巴细胞分泌细胞因子的影响；流式细胞仪检测了淋巴细胞凋亡；激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）观察了脓毒血症大鼠淋巴细胞[Ca2+]i的变化。结果显示CaSR激动剂促进脓毒血症大鼠外周血淋巴细胞CaSR的表达； CaSR的活化促进淋巴细胞促炎因子（IL-6和TNF-α）和抑炎因子（IL-4和IL-10）的分泌，诱导淋巴细胞凋亡，此作用与NF-κB和MAPK信号传导通路有关。CaSR活化还可通过PLC-IP3传导通路促进细胞膜上的TRPC3和TRPC6通道蛋白的表达调节淋巴细胞的钙稳态。我们的实验结果证实了脓毒血症中淋巴细胞钙敏感受体对细胞因子的分泌有一定作用，并与NF-κB、MAPK、JAKs/STAT和PLC-IP3等信号转导途径有关的假说。本课题从另一视角阐明了脓毒血症的发展机制，为脓毒血症的防治提供新的方向。