钙敏感受体在脓毒血症大鼠外周血淋巴细胞分泌细胞因子中的作用和机制

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基本信息

  • 批准号：
    81101315
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    孙轶华
  • 依托单位：
    哈尔滨医科大学
  • 学科分类：
    H2603.细胞学和血液学检验
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

脓毒血症是感染引起的全身炎症反应，多种细胞因子参与其中，而细胞因子主要由活化的淋巴细胞分泌。钙敏感受体（CaSR）是G蛋白偶联受体。本课题组首次发现心肌组织有CaSR存在，并证实它参与心肌缺血/再灌注损伤、细胞凋亡的发生。但是，CaSR与淋巴细胞及脓毒血症的关系，迄今国内外尚无报道。在前期研究中，我们发现健康人外周血淋巴细胞有CaSR表达，活化的淋巴细胞CaSR表达量增加并影响细胞因子的释放。我们推测脓毒血症中淋巴细胞CaSR对细胞因子的分泌也有一定作用，并可能与NF-kB、MAPK、JAks/STAT、PLC-IP3等信号转导途径有关。为证实这一假说，我们将复制大鼠脓毒血症模型，采用分子生物学、ELISA等技术，观察脓毒血症大鼠外周血淋巴细胞CaSR的表达、CaSR活化对细胞因子分泌的影响及其信号转导通路。本课题将从新的视觉阐明脓毒血症的发病和发展机制，并为脓毒血症的防治提供新的靶点。

结项摘要

本课题利用盲肠结扎穿孔术(CLP) 制作了脓毒症大鼠模型；Western blot检测了钙敏感受体（CaSR）蛋白、通道蛋白、TRPCs蛋白在淋巴细胞中的表达，同时检测了CaSR激动剂及NF-κB和MAPK信号传导通路阻断剂对淋巴细胞上相关信号传导通路蛋白的影响；ELISA检测了CaSR活化及NF-κB和MAPK信号传导通路阻断剂对淋巴细胞分泌细胞因子的影响；流式细胞仪检测了淋巴细胞凋亡；激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）观察了脓毒血症大鼠淋巴细胞[Ca2+]i的变化。结果显示CaSR激动剂促进脓毒血症大鼠外周血淋巴细胞CaSR的表达； CaSR的活化促进淋巴细胞促炎因子（IL-6和TNF-α）和抑炎因子（IL-4和IL-10）的分泌，诱导淋巴细胞凋亡，此作用与NF-κB和MAPK信号传导通路有关。CaSR活化还可通过PLC-IP3传导通路促进细胞膜上的TRPC3和TRPC6通道蛋白的表达调节淋巴细胞的钙稳态。我们的实验结果证实了脓毒血症中淋巴细胞钙敏感受体对细胞因子的分泌有一定作用，并与NF-κB、MAPK、JAKs/STAT和PLC-IP3等信号转导途径有关的假说。本课题从另一视角阐明了脓毒血症的发展机制，为脓毒血症的防治提供新的方向。

项目成果

期刊论文数量（10）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
span style=font-family:宋体;font-size:12pt;钙敏感受体及其与spanMAPK/span信号转导通路的关系/span
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    现代检验医学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    武春丽;孙轶华
  • 通讯作者：
    孙轶华
span style=font-family:宋体;font-size:12pt;慢病毒载体介导的spanRNA/span干扰及其在spanT/span淋巴细胞的应用/span
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    病理生理杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杜晶晶;孙轶华
  • 通讯作者：
    孙轶华
span style=font-family:宋体;font-size:12pt;钙敏感受体及其相关信号转导通路对细胞因子分泌的调控/span
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    检验医学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吴秋月;孙轶华
  • 通讯作者：
    孙轶华
span style=font-family:宋体;font-size:12pt;瞬时受体电位spanC/span通道研究进展/span
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    检验医学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    殷欣;孙轶华
  • 通讯作者：
    孙轶华
Expression of the calcium sensing receptor in human peripheral blood T lymphocyte and its contribution to cytokine secretion through MAPKs or NF-kappa B pathways (vol 53, pg 414, 2013)
人外周血 T 淋巴细胞中钙敏感受体的表达及其通过 MAPK 或 NF-κ B 途径对细胞因子分泌的贡献（第 53 卷，第 414 页，2013 年）
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    MOLECULAR IMMUNOLOGY
  • 影响因子：
    3.6
  • 作者：
    Wu, Qiuyue;Feng, Shanli;Li, Hong;Luan, Ying;Wen, Jie;Yan, Lixin;Zhao, Binhui;Xu, Changqing;Sun, Yihua
  • 通讯作者：
    Sun, Yihua

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  • 通讯作者：
    孙轶华

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
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          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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