肿瘤增殖调控中的RARγ非基因组效应机制

视黄酸受体（Retinoic Acid Receptor，RAR）是核受体家族中的重要一员，是视黄酸物质（retinoic acid，RA）的受体，在细胞生长、分化及凋亡等过程中发挥着重要作用。临床上常用视黄酸或衍生物治疗白血病和部分实体瘤，但某些肿瘤如肝癌在应用这类药物后会引起肿瘤转移的增加，其机制不清楚。本项目系统评价了RARγ在肝癌中的表达及其介导RA的非基因型作用。主要研究成果包括：（1）发现RARγ过量表达可显著促进肝癌动物荷瘤的生长，RARγ表达可介导RA的非基因型促肝癌细胞增殖作用，这解释了为何RA的临床试验得到的是令人沮丧的结果。我们在肝癌肿瘤标本和多种肝癌细胞的研究中发现，大量表达的RARγ可向细胞质转位。有趣的是，这种胞质定位的RARγ，与IκB的降解、p65核转位及NF-κB转录活性有密切关系，并且可以被RA调控。利用基因转染，我们发现，RARγ转染的肝癌细胞动物荷瘤表型出很快的生长速度，表明RARγ过表达具有促癌生长作用；（2）进一步实验结果说明，RARγ激活NF-κB是通过 RARγ与p85a相互作用激活AKT，并导致IκB的降解来实现的。有趣的是，我们这里描述的RARγ通过PI3K/AKT信号通路激活NF-κB的作用方式不同于已经报道的发生在核内的NF-κB和RARs之间相互作用方式，揭示了RARγ通过非基因型功能激活NF-κB信号通路的一种新机制；（3）RARγ在过表达的时候，可以大量地出现于核外，而通过突变体的分析，我们发现这种转位可能由RARγ A/B富含脯氨酸（PPII）结构域所介导，因为缺失了A/B结构域和PPII结构基序的RARγ全部位于核内，而单纯转染A/B结构域，其表达则完全位于核外。因而，A/B结构域对于RARγ出核调控可能是非常重要的；（4）通过进一步的分析，我们发现RARγ的A/B结构域是其与p85a相互作用及激活PI3K/AKT和NF-B生长信号转导通路所必需的，RA的促生长作用主要利用的也是这条通道；（5）我们发现刺槐素以及衍生物可通过直接结合于RARγ，抑制RARγ与p85的相互作用，从而抑制PI3K/AKT和NF-B通路，这种作用导致p53和Bax的激活，从而引起癌细胞的大量凋亡。因而，本项目的新发现为肿瘤的抗药性提供了一种可能的分子解释，并为发展肿瘤特异性治疗药物提供了一种新的思路。