以腺病毒为载体的SHARP-2特异的RNA干扰法防治器官移植排异反应

SHARP-2能显著上调IL-2、IFN-gama的表达并直接促进效应T细胞的增殖和活化，故对SHARP-2的抑制能有效防治器官移植排异反应。申请者留学期间已通过人工合成的siRNA诱导了SHARP-2特异的RNA干扰，并由此抑制了IL-2的表达。本项目拟采用H1-RNA启动子和短发夹式RNA序列，建立以腺病毒为载体的SHARP-2小干扰RNA胞内表达系统,并将该重组腺病毒感染大鼠na?ve CD4+ T细胞,监测被激活后其IL-2、IFN-gama等细胞因子表达受抑程度及细胞功能变化。最后将上述RNA干扰系统用于大鼠肾移植受体，用实时定量PCR,Western blot,ELISA,流式细胞及荧光标记等现代分子生物学、组织病理学及免疫学技术研究其在防治器官移植排异反应中的功效及安全性。本项目旨在利用RNA干扰技术探索排异反应防治新法，对移植免疫及器官移植学科的基础及临床研究具有重大意义。