膜联蛋白5对Leydig细胞分泌功能的影响及促性腺激素释放激素调控其表达的机制

应用real-time RT-PCR、Western blot等技术，观察膜联蛋白5（annexin 5）、siRNA-annexin 5、pcDNA-annexin 5作用或转染Leydig细胞后，细胞内3β-HSD及细胞分泌的睾酮含量的变化。观察促性腺激素释放激素类似物（GnRHa）作用于原代培养大鼠Leydig细胞后，磷酸化的细胞丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）的信号转导通路：ERK、JNK和p38的分布及含量、细胞内PKC活性及钙离子浓度等指标的改变。进一步观察GnRHa分别和MAPKK的阻断剂PD98059、Raf的阻断剂ZM336372等物质共同作用于Leydig细胞后，Leydig细胞内annexin 5的含量及annexin 5 mRNA的表达变化。旨在阐明annexin 5对Leydig细胞分泌功能的影响及GnRH调控Leydig细胞中annexin 5表达的内在机制。